【求助】关于葡萄糖转运实验的一些问题

参与者：qqhhrainbow

1、我买回来的氚-2D-葡萄糖，包装上标注的0.25mci……0.25ml in ethanol： water 9：1……这些信息如何理解，如果我要达到1 μCi/ml的加药量，应该从包装瓶里去出多少加入1ML水呢？

2、还有就是最后收集细胞的问题，为什么有的实验是将液体收到滤纸上烤干放入闪烁瓶，有的是直接把收集液放入闪烁液呢？如果我做葡萄糖摄取实验该选择哪种方法呢？

3、最后的问题是，实验为了平衡闪烁值还要检测没孔的蛋白含量，如果用NaOH裂解细胞，那么这裂解液能直接用于brodford法测蛋白么？或者还要有什么处理步骤？

实验有太多疑惑，help me help me please，大家一起来摸索！谢谢

参与者：ailaopo99

我在做葡萄糖转运试验是遇到了第二个问题，用NaOH裂解细胞后提取的蛋白用brodford法测不出浓度（平时用RIPA＋PMSF提蛋白时浓度很高），搭车请大侠指导一下！！！

参与者：xkfang1018

氚-2D-葡萄糖，上面除了注明它的μCi/ml，好像还注明了Ci/mmol，通过换算可以知道μCi/mol

关于糖摄取实验，是干燥放在滤纸上还是收集液放在闪烁液中。

1.干燥放在滤纸上，然后加入pop/popop闪烁液

2.收集液，可能需要特殊闪烁液（比较昂贵），是能将水相和有机相混合起来的那种，如supermix

裂解细胞，0.2%NaOH。我用BCA法，没干扰的。

参与者：ailaopo99

文献上很多也是用的Bradford法测蛋白浓度。是不是NaOH裂解的细胞蛋白经过处理后才能用于Bradford法测量呢？

参与者：titan1983

路过，我想插嘴问一下，测试葡萄糖转运这个实验，要是没有LSC的话，能不能用医院里的自动生化分析仪来测定细胞对糖的转运效率呢？谢谢！