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问:

现用免疫磁珠(美天妮)分选cd4+和cd8+T淋巴细胞,效果不是太理想。单个核细胞2×106,分离出cd4+只有1×105个,buffer等试剂都没有问题。不知道还有什么地方没有注意到,希望各位战友指点?

答:

呵呵,我也用美天妮分离CD14+单核细胞,结果还不错。

分出的细胞占单个核细胞五分之一。

我是根据说明书进行操作的,觉得以下几方面比较重要:

(1)?细胞计数要准确,不能超过上样量。

(2)?预冷磁珠分离液。

(3)?磁珠分离缓冲液不能有气泡

(4)?不能让分离柱干掉

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