|
首先先，包装慢病毒时，转染效率要高，293细胞推荐使用磷酸钙法，便宜，因为一是包慢病毒需要的细胞量大，二是磷酸钙对293细胞转染可以非常轻松上90%（24h）.具体注意点有：293转染细胞活性要好，磷酸钙用bbs缓冲液，bbs缓冲液ph好精确控制，提的质粒纯度要高（推荐qiagen的大抽，磷酸钙自己配不好的话，购买碧云天的可以作40个100mm 盘209元），节约其他转染试剂的经费投到质粒试剂盒，都要划算。）质粒配比要计算，头18小时用3%co2，24h后用10% co2。
再次，搜集上清要测滴度，然后及时离心浓缩（试剂盒贵的吓死人，效果不好，我用过）。 ps：没有浓缩条件，可以考虑24h换液收集病毒时，换目标细胞培养基。 原液能轻松到5*10e6，浓缩后能上e9。 |
词条内容仅供参考，如果您需要解决具体问题
（尤其在法律、医学等领域），建议您咨询相关领域专业人士。
2
收藏到: 
