ayao0问:前几天学习做细胞脂质体转染 看师姐是用的加血清的培养基,整个过程比以前的方法简单方便了很多 不用过四个小时就去换液,可以过了48个小时看转染效率很不好,以前也有人用这种方法做过,很成功。 到底这种新的方法行不行的通,做的时候需要注意哪些问题 生命经纬网友kikie认为: 用的是invitrogen的lipofectamine2000,说明书上明确说可以用含血清的培养基: Prepare complexes in the plate and culture medium,in the presence or absence of serum. 但是过4~6小时还是要换液,为的是减少脂质体对细胞的损伤。 生命经纬网友monica912认为: 这种方法是完全可以的,我经常这样做,没问题的。 只是转染后最好4~6小时或过夜就换液,目的就像楼上说的减少脂质体对细胞的损伤。换液时可以用无血清的培养液洗一下细胞(一定要轻),然后再加培养液。 生命经纬网友biologychem认为: 我认为转染时最好换无血清培养基,因为这样可以让细胞饥饿一下,有助于随后转染时细胞对脂质体-质粒复合物的摄取,过4-8小时再换为正常培养基,减少脂质体对细胞的毒性作用,这样比较好. 生命经纬网友pazj认为: 我的做法和biologychem 的一样,转染率很高的,我觉得很不错的, 转染时用血清培养基的这种方法,我没试过。 |
→如果您认为本词条还有待完善,请 编辑词条
词条内容仅供参考,如果您需要解决具体问题
(尤其在法律、医学等领域),建议您咨询相关领域专业人士。
2