细胞凋亡的检测方法,从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。 一、早期检测 1、PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测 2、细胞内氧化还原状态改变的检测 3、细胞色素C的定位检测 4、线粒体膜电位变化的检测 二、 晚期检测 1、TUNEL 2、LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测) 当凋亡细胞比例较小以及检测样品量很少(如活体组织切片)时,直接琼脂糖电泳可能观察不到核DNA的变化。CLONTECH公司的ApoAlert?LM-PCR Ladder Assay Kit通过LM-PCR(ligation-mediated PCR),连上特异性接头,专一性地扩增核小体的梯度片段,从而灵敏地检测凋亡时产生的核小体的梯度片段。此外,LM-PCR 检测是半定量的,因此相同凋亡程度的不同样品可进行比较。 上述两种方法都针对细胞凋亡晚期核DNA断裂这一特征,但细胞受到其它损伤(如机械损伤,紫外线等)也会产生这一现象,因此它对细胞凋亡的检测会受到其它原因的干扰。 3、Telemerase Detection (端粒酶检测) 三、mRNA水平的检测 用定量PCR技术来检测基因表达水平。 |
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