一、实验目的 掌握流式细胞仪的工作原理 二、实验原理 流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化,如G0/G1期的DNA含量为2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法,通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比。 三、仪器、材料与试剂 仪器:流式细胞仪,细胞培养设备,离心机,水浴,冰箱 四、实验步骤 1、取对数生长期细胞,倒去培养液,胰酶适度消化细胞,用培养液吹打,800rpm , 离心 15 min去上清。 原件请点击下面的链接下载: 流式细胞术细胞周期分析样品保存条.pdf |
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