用荧光蛋白去转染293细胞,在荧光显微镜目检下,估计转染效率大约在70-80%之间,可用流式细胞仪检测时,转染效率却只有13%左右。 如果流式的结果是在阴性对照的基础得出的话,建议采取流式的最终结果,因为人的眼睛敏感度比可能比得上荧光监测器,同时流式可以检测到的细胞数目也不是显微镜下计数可比拟的。 我最近也在做转染的效率的检测,荧光显微镜下可看到近70-80%的阳性细胞,可流式结果近50%,问高人后亦建议取流式结果,如果要提高转染效率可采取轮转的方法,或分选转染成功的细胞进行后续研究。 |
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