我欲先构建某一个病毒的cDNA文库(construction of the cDNA phage-display library ),再用噬菌体展示技术来筛与某一受体蛋白对应的病毒表面的配体蛋白。 我想问的是: 1、我应该选择哪种噬菌体作为载体(优点?) 2、文库的构建至关重要,有没有好的专门先用来构建cDNA文库,再做噬菌体展示的试剂盒(厂家、价格?) 3、有没有相关的书、文献推荐 4、该技术的难点和注意点? New england biolabs有现成的盒子买,附件里有其中一种产品的说明书: 我一直就对phage display感兴趣,现在正表达用随机肽库筛选到的肽。我觉得你先要看你需要用的是构型文库,还是线性文库。或者不确定,干脆两种都建咯。NEB公司的试剂盒是比较好用啦,什么东西都现成。phage display技术本身没有太多难点,主要还是其它方面的吧,其实建文库容易,但筛选到后,活性是另一个大问题啦!呵呵,祝你好运,可以交流。 因为我筛选的是随机肽库,得到阳性克隆后,直接用于免疫小鼠。据文献报道,噬菌体本身是很好的免疫载体,得到的抗体多抗表达在噬菌体PIII蛋白的peptide。检测抗体效价时,可以用野生型phage做阴性对照。 |
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