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标签: PCR仪 使用

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步骤:

1、开机:打开开关,视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后,显示RUN-ENTER菜单:“-RUN ENTER PROGRAM  PROGRAM ”准备执行程序。

2、放入样本管,关紧盖子。

3、如果要运行已经编好的程序,则直接按《Proceed》,用箭头键选择已储存的程序,按《Proceed》,则屏幕显示:“-ENABLE      DISABLE  HEATED LID按《Proceed》选择ENABLE,则开始执行程序。

4、如果要输入新的程序,则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》,屏幕显示  “ -NEW LIST EDIT DELET”,按《Proceed》,1)选择NEW,命名新的程序,最多8个字母,输入后按《Proceed》确认。

2)输入程序步骤:名字输入后,显示“ STEP1  _TEMP GOTO   OPITON  END”,按《Proceed》则可以输入温度(0~100℃),按《Proceed》确认后,则可以输入孵育时间,用《Select》键移动光标,输入数字,完成后按《Proceed》确认,跳到下一步,输入方式同上。

3)选择GOTO,输入循环步骤时链接到第几步(循环数最多可达9999次)(为实际循环数-1)。

4) 选择option,显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE ”再选择increment,按《Proceed》确认,输入初始的温度,确认后输入时间,按《Proceed》确认,然后输入每个循环增加或减少的温度,增加用正值,减少用负值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》确认。选择extend,按《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间(-60~60秒),按《Proceed》确认。

选择slop(指温度上升或下降的速率),输入温度的改变值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》确认,然后输入加热或致冷的速度,按《Proceed》确认。

4)选择End,输入结束步骤。

5、输入完成的程序后,到RUN-ENTER菜单,选择新程序,开始运行。

6、其它:用《pause》可以暂停一个运行的程序,再按一次继续程序。用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

编辑程序:

1、可以用《Cancel》键删除输错的值,输入新的值后按《Proceed》确认。

2、对于未输完的程序,要先输入END,按《Proceed》将程序储存后才能删除。

3、删除已经储存的程序:从RUN-ENTER菜单中选择RUN-PROGRAM,按《Proceed》,显示主菜单,选择DELET,用《Select》选择删除。

4、查看程序的步骤:在主菜单上选择LIST,按《Proceed》,用《Select》将选择名称,再按《Proceed》,显示程序的第一步,用《Select》键向前、向后翻页查看,此时不能改变程序的值。

编辑已有的程序:

1、从RUN-ENTER菜单中选择RUN-PROGRAM,按《Proceed》,显示主菜单,选择EDIT,按《Proceed》确认,用《Select》键选择要编辑的程序,按《Proceed》显示程序的第一步。

2、用《Select》键将光标移到要改变的温度或循环的值上,键入新值,按《Proceed》确认,按《Cancel》删除键入的值,出现空格,键入新值后确认。

注:一旦值被改变或删除,原来的值不能恢复,必须重新键入。

3、编辑时间值:必须重新键入小时、分钟、秒,按《Proceed》。

如何设置一个PCR体系:

一般分为8步:

1、预变性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。

2、变性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。

3、退火:温度自定,30s~2min。

4、延伸:70~75℃,一般72℃,对于<2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。

5、循环数:一般25~35个循环。

6、最终延伸:72℃,5~15min。

7、保存:10℃,时间设为0。

8、END。

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