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标签: 流式细胞仪 碘化丙啶染色法 类胰岛素生长因子Ⅰ

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骨骼肌成肌细胞是广泛存在于体内、具有较强增殖与分化潜能的前体细胞,早在上世纪90年代就应用于细胞移植治疗遗传性肌病、骨骼肌损伤修复以及心肌缺血损伤修复的研究。随着组织工程的发展,骨骼肌成肌细胞已经广泛用于肌组织相关组织工程构建的研究中。

在前期组织工程食管构建的研究中,作者在体外联合应用上皮细胞与成肌细胞在小肠黏膜下层支架上复合培养,结果发现成肌细胞能够在体外增殖、分化形成多层细胞结构。不论细胞移植还是组织器官构建,足量的、增殖与分化能力旺盛的种子细胞是整个研究的核心与基础。为了在短时间内获得大量生长特性一致的种子细胞,单纯依靠原代成肌细胞是难以实现的,因此研究成肌细胞传代与增殖具有重要意义。大量研究表明,类胰岛素生长因子I(insulin-like growth factor-I,IGF-I)促成肌细胞增殖作用明显,低浓度水平就有活性,但是对于其作用机制目前还不太清楚。流式细胞技术广泛用于细胞生物学的研究,对细胞核型与细胞周期的分析具有不可替代的优势。

本实验应用流式细胞术通过检测能嵌入双链核酸碱基对的插入性荧光染料PI,测定各亚周期所占时相,从而检测在类胰岛素生长因子下成肌细胞增殖动力学的变化,以探讨类胰岛素生长因子I对成肌细胞增殖作用原理,同时也能获得更多的生长特性一致的传代成肌细胞用于肌组织研究。

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