茶多酚是茶叶中的重要品质组成，含量多少与品种、栽培条件、加工方法有关，必须掌握其测定方法。酒石酸铁比色法，方法简便、快速，重现性好，容易掌握，已列为国家标准方法。

在一定的pH条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物，在波长540nm处比色，在适当的浓度范围内，茶多酚的量与呈色的深浅成正比，可用分光光度法定量。本实验学习用酒石酸比色法测定茶多酚类物质的方法。

一、试材及用具

1．试材 茶叶磨碎试样

2．仪器 分光光度计、实验室常规玻璃仪器（三角瓶、漏斗、容量瓶、移液管、量筒等）

3．试剂

（1）酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁(FeSO4•7H2O)1g与酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O）5g，加水溶解稀释至1L。该溶液可稳定10 d。

（2）pH7.5的磷酸缓冲液 先配制以下两种溶液：

a．1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液 称取11.876g的Na2HPO4•2H2O，加水溶解，稀释至1L (若用无结晶水的需称取9.47g，若用含12个结晶水的需称取23.872g，其余操作相同)。

b．1/15mol/L磷酸二氢钾溶液 称取经110℃烘箱烘2h后的KH2PO4 9.078g，加水定容至1L。

取a液85mL和b液15mL混合后，即为pH7.5的缓冲液。

二、方法步骤

1．配制标准溶液

称取茶多酚纯品0.2500g，加水溶解定容至250mL，混匀，即为每毫升含1mg茶多酚的标准溶液。

2．绘制标准曲线

分别称取标准溶液0.0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL于一组25mL棕色容量瓶中，各加水至5mL，再加酒石酸铁溶液5mL，加缓冲液至刻度，混匀后用10mm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测定吸光度，绘制出标准曲线。

3．茶汤制备

准确称取磨碎试样3g，加450mL沸水，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇瓶一次，过滤。洗涤残渣，滤液合并于500mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。

4．测定

准确吸取茶汤1mL，注入25mL容量瓶中，加水4mL，酒石酸铁溶液5mL，用缓冲液定容至刻度，混匀。用10mm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测吸光度，从标准曲线查得溶液含茶多酚的量。