骨肿瘤诊断需要解剖学、组织学和胚胎学等基础知识，对病变需认真观察，仔细分析，但更重要的是对临床资料及X线所见要特别重视。骨肿瘤形态变异较大，而临床X线观察较全面，病理镜检有一定局限性，而一些癌基因改变是与某一型骨肿瘤密切 相关，即为肿瘤特异性基因，因此在骨肿瘤诊断方面在坚持临床、X线及病理三结合 的诊断原则基础上，通过PCR技术对肿瘤特异性癌基因变化的检测，可以更好地辅助骨肿瘤的诊断，具有其它方法不可代替的优越性。

1、成骨系统肿瘤的诊断

本系统中恶性肿瘤最多见的是骨肉瘤，由于骨肉瘤类型繁多，有多方向分化特点，故形态复杂，除常见的成骨型、成软骨型、成纤维型外，尚有较罕见的恶纤维型、血管扩张型、小圆细胞型，髓内高分化型和富于巨细型的骨肉瘤。骨肉瘤虽多由 髓内发生，但也可由骨外膜发生，向外生长形成骨表面骨肉瘤。骨表面骨肉瘤近年来又根据其形态及恶性度的不同分成四个亚型，尽管各型有其形态特征，但在常规诊断 时还是有不少被误诊。肿瘤生物学研究表明，骨肉瘤中细胞DNA含量明显高于正常细胞，并具有一系列癌基因的改变，如骨肉瘤中75%的P53基因突变，mdm2、c-myc及 c-raf扩增，TPR-met重排等。

首先，我们可以用定量PCR方法检测细胞中DNA含量，来判断肿瘤的良恶性，接着，利用多重PCR或巢式PCR检测P53、mdm2、c-raf、met等的基因改变，来确诊是否为骨肉瘤，同样可以利用数种骨肉瘤特异的单克隆抗体，采用免疫PCR方法对骨肉瘤进行诊断及分型。随着nm生物学技术的发展，可以利用原位PCR方法，先确定好特异性癌基因产物的位置，然后在透射电镱下动态观察其形态及结构，这样可以更好地确诊。

2、软骨系统肿瘤的诊断

软骨肿瘤的恶性程度除与细胞异形性有关外，和肿瘤发生部位及其体积大小亦密切相关。发生在近心端的如骨盆、肩胛等直径大于6cm者，即使细胞异形性不太明显， 也可能为高分化软骨肉瘤，反之若肿瘤发生在远端，虽细胞较密集有中等程度异形 性，但一般显示良性生物学行为，可诊断为良性肿瘤。软骨肿瘤分类也十分复杂，根据形态学诊断易误诊，从基因水平来诊断更符合实际情况。首先要区分是良性肿瘤还 是恶性肿瘤，运用定量PCR方法，检测细胞中DNA含量，可以判断良恶性。其次，要与骨及其它组织肿瘤相鉴别。研究表明，Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、骨形成蛋白、骨钙素、 骨连接蛋白等均为骨特异性蛋白，运用定量PCR方法，检测相应基因的表达程度可以确定其组织来源，同样也可以利用相应的单克隆抗体，采用免疫PCR方法确定其组织来源及分型。

3、骨恶性肿瘤转移的诊断

近几年的研究表明，癌基因mdm2的扩增与骨恶性肿瘤的转移密切相关，mn23-H1在转移的骨恶性肿瘤中呈低表达，在分化良好的肿瘤中呈高表达。因此，运用定量PCR方法检测癌基因mdm2扩增程度，以及mn23-H1的表达程度可以判断骨恶性肿瘤有无转移。

4、骨恶性肿瘤治疗效果的判断

近几年的研究表明，微小转移灶在骨恶性肿瘤发生后不久就存在于周围的血液循环中，骨肿瘤的手术治疗只能解决局部问题，而微小转移灶的清除必须依赖于放疗、 化疗或免疫治疗，因此，检测外周血中有无微小残余病灶，可以判断治疗效果，并对 是否需要继续治疗提供依据。