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词条创建者:admin创建时间:12-08 00:37
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摘要:问:最近做细胞转染,预筛选稳定克隆,载体为pEGFP-N1,pIERS现在是平行做几个基因,转然后,只有空载体和一个基因可以看到绿色荧光,其余均没有,这会是什么原因呢?怎么补救啊?答:需要考虑的问题有:1.你的细胞和转染的方法,[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-08 00:36
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摘要:问:构建逆转录病毒为载体的DNA(质粒),阳离子脂质体2000(过期的),转染病毒包装细胞pt67,G418筛选,在换液和传代过程中均会有细胞死亡(贴壁细胞漂浮)。求教原因。换液3.6ml DMEM+0.4ml新生牛血清+24μlG418传代用胰酶ph[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-08 00:36
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摘要:问:我想问个问题关于转染细胞的质粒,必须用试剂盒提取的么?用碱裂解法可以么?抽提两次浓缩一次,测得浓度是8点多,ratio是1.814,可以送去转染细胞不?人的细胞系。答:碱裂解法比试剂盒提取的纯度要低,但是浓度高。其实,剂[阅读全文]

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