摘要:消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞用DMEM配0.2%的1型胶原酶(用20的血清的DMEM配可能更好,有类似文献),分装于青霉素小并,每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1瓶消化液中消化,消化约10几个小时(消化程度的把握要体会),离[阅读全文:]
摘要:细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下:1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高[阅读全文:]
摘要:基本原理:本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法,主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作,且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材1)外周血单个核细胞2)1×PBS和10×[阅读全文:]
摘要:器材与试剂干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤一. 水的制备细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水二.PBS的制备与消[阅读全文:]
摘要:体外肝细胞损伤模型建立(CCl4和H2O2)1、大鼠肝细胞的分离和培养大鼠4%戊巴比妥麻醉,门静脉插管,先以无钙灌流液灌流,继以37℃通入O2的Ⅳ型胶原酶灌流液继续循环灌流15 min。将肝脏移至一平皿内,轻轻撕去肝包膜后,加入含5%[阅读全文:]
摘要:1.如果财力允许,培养基一定要买已经配好的,因为ph值对细胞影响很大,并且很多时候对于新手来说,即使细胞培养失败你是找不出合理的理由的。所以尽最大可能减少不稳定因素的影响!2.我通过实践证明培养基最好是DMEM与1640[阅读全文:]
摘要:在人体发育过程中,γδΤ细胞先于αβΤ细胞出现,γδΤ细胞 主要分布于皮肤,小肠、食道、肺和生殖器官等上皮组织内,而在外周血中淋巴细胞仅占0.5%-5%。外周血中γδ&[阅读全文:]
摘要:1、分离制备单细胞悬液:(1)体外培养的细胞株:用胰酶消化,最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液,细胞要计数,具体的量我前边已经说过。(2)体内脏器细胞:处死动物,取出脏器,于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。2、胶板制备:(1[阅读全文:]