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标签: 解剖镜 显微操作

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  显微操作(micromanipulation)是指在光学显微镜或解剖镜的可见视野内,操作者一边观察一边使用微玻璃针、解剖刀、吸量管等器具,进行手术、解剖、注射等实验操作。由于最初用于微小生物体的结构解剖,故又称显微手术。
  为了运用上述各器具,而采用显微解剖器。显微解剖器有三种类型,即利用金属弹性的Chamber型、利用螺丝的Peterh型和利用流体弹性的De Fonbrun型。采用显微操作已取得许多实验成果,如分离出微生物或孢子或培养细胞,进行单细胞培养;对生长点等施以显微手术,对其进行功能的研究;插入微电极,进行细胞·细胞间的电位差测量;将细胞核等细胞器进行摘除或移入而进行的生理学或遗传学的实验等。
  显微操作的特点是直观、定位准确并可进行稳定的三维操作。它使各类手术操作的度量水平比在肉眼和徒手条件下的操作提高了成百至上千倍。显微镜的高分辨率加上显微工具及其三维驱动装置以及微量注射液压装置等的高精密度,使显微操作可达到很高的准确度。
沿革
  1859年美国 H·D·施米特,首次设计了一种能在显微镜下解剖动物组织的装置。
  1887年法国 L·查勃莱在显微镜下用微针破坏海鞘的卵裂球以研究细胞的发育能力。
  1921~1922年美国R·钱伯斯首先报道了定名为显微操作器的装置,可在高倍显微镜下解剖动物细胞的染色体。
  1930年美国麻省的埃默森公司首先专利出售杠杆滑动式显微操作器。之后又经改良而发展成现在使用的各种显微操作器。
类别
  分为显微镜下操作和解剖镜下操作两类。
  显微镜下操作的设备:包括配有倒相和长焦距物镜的显微镜、显微操作器、显微工具制作器、自动拉针器、磨针器等。常用的显微操作器有3种:机械推动式显微操作器(图1)、滑动式显微操作器和液压式显微操作器。拉针器也有许多种,如垂直重力式电动拉针器、水平弹簧式拉针器和电磁式拉针器等。显微工具制作器是用来制备微针、微吸管、微刀、微钩等显微工具的,它由可调电热丝和除去镜台的解剖镜等组合而成,适于针尖的加工。
  解剖镜下操作的设备:这里所用设备的精密度没有显微镜下使用的高,可根据研究对象及研究目的自行设计。例如中国科学院发育生物学研究所设计的解剖镜用显微操作器(图2)适用于两栖类和鱼类等卵子的细胞核移植和核酸或基因的卵内显微注射等工作。
  显微操作用仪器应根据具体的实验材料和实验目的及现有设备来选择,并注意仪器间的配套。有些在解剖镜下的实验操作不需要特殊的显微操作装置,可直接用双手持显微工具进行。如手持玻璃针在解剖镜下分离动物胚胎的卵裂球、分离胚胎组织及进行组织块移植等。
应用
  包括细胞器的移植;各种大分子物质(包括DNA片段或特定的基因、信使核糖核酸、蛋白质、激素、酶类、荧光抗体、药物及染料等)向细胞、细胞核内的显微注射、异种精子向卵子内的注射、哺乳动物胚泡的显微注射;各种动物的卵子和胚胎、特别是体积极小的哺乳动物卵子和胚胎在体外培养条件下的显微切割、胚胎细胞的交换、重组和聚集以及显微辐射(即用微束紫外光或激光在显微镜下轰击细胞内的某一部分精细结构)等一系列技术。这些技术的建立对于研究个体发生和细胞分化、核质关系、细胞的结构和生物大分子的功能、细胞的诱变与杂交、基因表达与发育调节、外源遗传物质对细胞、原生质体或生物体的作用等方面均有重要作用。
  有些显微操作技术如胚胎切割、嵌合体制作,显微注射外源基因以获得转基因动物等已开始应用到大家畜上;细胞核移植已用于经济鱼类的克隆。

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解剖显微镜(dissecting microscope)编辑本段回目录

  又被称为实体显微镜或立体显微镜,是为了不同的工作需求所设计的显微镜。
  特点及应用:
  解剖显微镜能形成正立像,立体感强。常常用在一些固体样本的表面观察,或是解剖、钟表制作和小电路板检查等工作上。
  原理:
  解剖显微镜的基本结构包括镜体,其中装有几组不同放大倍数的物镜;镜体的上端安装着双目镜筒,其下端的密封金属壳中安装着五组棱镜组,镜体下面安装着一个大物镜,使目镜、棱镜、物镜组成一个完整的光学系统。物体经物镜作第一次放大后,由五角棱镜使物像正转,再经目镜作第二次放大,使在目镜中观察到正立的物像。在镜体架上还有粗调和微调手轮,用以调节焦距。双目镜筒上安装着目镜,目镜上有目镜调节圈,以调节两眼的不同视力。
  解剖显微镜的光路设计有两种: The Greenough Concept和The Telescope Concept。立体显微镜又称“实体显微镜”或“解剖镜”,在观察物体时能产生正立的三维空间影像。立体感强,成像清晰和宽阔,又具有长工作距离,并是适用范围非常广泛的常规显微镜。操作方便、直观、检定效率高,适用于电子工业生产线的检验、印刷线路板的检定、印刷电路组件中出现的焊接缺陷(印刷错位、塌边等)的检定、单板PC的检定、真空荧光显示屏VFD的检定等等,配测量软件可以测量各种数据。它有如下特点:
  1. 双目镜筒中的左右两光束不是平行,而是具有一定的夹角——体视角(一般为12度---15度),因此成像具有三维立体感;
  2. 像是直立的,便于操作和解剖,这是由于在目镜下方的棱镜把像倒转过来的缘故;
  3. 虽然放大率不如常规显微镜,但其工作距离很长
  4. 焦深大,便于观察被检物体的全层。
  5. 视场直径大。
  目前立体镜的光学结构是:由一个共用的初级物镜,对物体成像后的两光束被两组中间物镜——变焦镜分开,并成一体视角再经各自的目镜成像,它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的,因此又称为“连续变倍体视显微镜”(Zoom—stereo microscope)。随着应用的要求,目前体视镜可选配丰富的选购附件,如荧光,照相,摄像,冷光源等等。

解剖镜的构造和功能编辑本段回目录

  双目解剖镜又称体视显微镜、立体显微镜、实体显微镜等,是较精密的光学仪器。其形式虽然多种多样,但结构基本一致。现以22XB—01型解剖镜为例介绍如下。
    (一)机械部分
    1.底座——镜体的最下面部分。在底座的中央有1个可活动的圆盘,即载物盘。载物盘通常一面为白色,一面为黑色,也有的为透透明玻璃制成。 在底座的中后部有1对压脚,用以压虫体和其它易动物体。
      支柱——是支持镜体的部件,也是焦距的粗调装置,可使镜体上下移动,左右旋转。
    2.调焦装置——支柱上部和下部的两个螺丝。上方的为锁紧螺丝,下方的为升降螺丝。
  3.倍率盘——镜体中央的1个可转动的圆盘,用以改变放大倍率。
    (二)光学部分
    1.物镜——在镜体下,安装有大物镜(镜体内部还有变倍物镜)。
  2.棱镜罩——镜身上面有两个棱镜罩,内部为棱镜,使物象倒转,在目镜中可看到物体的正像。
  3.目镜管和目镜——在棱镜罩上方,左右各有一个目镜管,用以承放目镜。
    4.视觉圈——位于右目镜管上端,可调节目镜的上下距离,使观察者左右两眼都可以看到清晰物体。
  5.眼罩——设在目镜上,可防止外来光线的干扰。
  6.防尘罩——有些型号的解剖镜带有防尘罩,使用前后盖在目镜管上端。

解剖镜的使用方法和注意事项编辑本段回目录

  1.取用(或放回)时,若需要连镜箱搬动,应将镜箱锁好,以免零件倾出而损坏。同时镜箱的钥匙必须拔除,避免不小心将钥匙碰断在锁孔里。
  2.取用解剖镜时,必须用右手握持支柱,右手托住底座,小心平稳地取出或移动。
  3.使用前必须检查附件是否缺少及镜体各部有无损坏,转动升降螺丝有无故障,若有问题及时报告。
  4.取下镜管上的防尘罩,换上目镜,再将眼罩放在目镜的上端。
  5.将所观察的物体置于玻片上或蜡盘中,再放到载物盘上,待观察。
  6.拧开锁紧螺丝,先把镜体上升到一定高度,然后锁紧镜体。
  7.观察时,先转动目镜管,使两个目镜间的宽度适合于两眼间的距离。然后转动升降螺丝,使无视觉圈的目镜成像清晰,同时转动视觉圈,使另一目镜的物像清晰。需要放大观察时,转动倍率盘。
  8.调节焦距时,转动升降螺丝应适度,不要用力过猛,以免滑丝。
  9.目镜或物镜上有异物时,可用擦镜纸轻轻擦拭。
    10.用毕后,清理载物盘上,松开锁紧螺丝将镜体放下,并锁紧。用布把镜身擦干净,放入镜箱内。

数码解剖镜的操作编辑本段回目录

数码解剖镜操作方法和注意事项
1、持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方。
2、轻拿轻放,不可把解剖镜放置在实验台的边缘,以免碰翻落地。
3、保持解剖镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭。
4、开启电源,调节焦距,使影像清晰。
5、观察完毕,关闭光源,关闭电源。
6、把解剖镜放回原保管箱中。
7、防潮、防尘、防热、防剧烈震动。
8、不能拆修,严格遵守操作规程,发生故障时及时报告。

莱卡数码解剖镜使用方法和注意事项

1、插好电源。打开冷光源开关。
2、需要图片,同时打开电脑(事先已经过培训的方可使用)。
3、样品置于物镜下,先用1X物镜,把有刻度的放大旋扭调小,找到样品后再放大到合适位置。
4、调动底座右侧反光板旋扭,可获得不同的光线强度和不同的视野。
5、在关机前要将冷光源的电压调到最小。
6、用完后请关掉电源。
特别注意事项:
1、 禁止在短时间内频繁开启和关闭电源,应该在关闭电源15分钟后才能再次启动电源。否则,很容易损坏设备。
2、 禁止用该设备观察有腐蚀性、挥发性和有毒的样品,否则极容易破坏价值1万余美圆的光学镜头。
3、 底座上面承物的圆形玻璃是一种特殊的滤光片,通过该片能获得真实颜色的图象,禁止任何人拿金属等表面不光滑的样品使用该设备。
4、 使用过程中不准擅自修改软件的参数。

解剖镜的操作编辑本段回目录

1、 开启电源,观察时调节光源,使整个视野中光线均匀。
2、 调节焦距,使影像清晰。
3、 保持解剖镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭。
4、 开启电视电源,选择视频状态。调节微调,使电视上影像清晰。
5、 观察完毕,关闭解剖镜光源,关闭电源。套上防尘套。
6、 关闭电视电源。

 

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