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荧光图像的记录方法

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一般染色之标本,应立即观察,因当时荧光最显著;若不能马上观察,须储存于干燥盒(Polyethylene Bag) 内,有时在0~5℃ 储存,可保存一个月左右,仍可呈现特异荧光。


在荧光显微镜之紫外线照射下,染出之特异性荧光会很快消失,故要照相存证者,须于材料新鲜时染色,并马上照相,才会有好效果。若使用自动相机拍照,则底片以Kodacolo r(ASA 100) film 为宜,仪器则设定为ASA 400,照完后送洗时应指定以ASA 400 冲洗。以此相片再使用适当之正片底片(Kodak#5072) 照相,此时应改变不同曝光时间的长短而选最好的片子。

荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。


作为一般定性观察,基本上可靠的。随着技术科学的发展,在不同程度上采用客观指标记录判断结果,如用细胞分光光度计,图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果,也必须结合主观的判断。


荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片如ASA200以上或24以上。因紫外光对荧光猝灭作用大,如FITC的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。


一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置CCD显微镜摄像头或CMOS显微镜摄像头。

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