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绒毛膜促性腺激素的检测

标签: 绒毛膜促性腺激素

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    已知在妊娠期,胎盘绒毛滋养细胞和胎儿可产生多种特异蛋白,其中可作为早期妊娠诊断的指标有:人绒毛膜促性腺激素(human choriongonadotropin, hCG)、早孕因子(early pregnancy factor, EPF)、妊娠特异性β1糖蛋白(pregnancy specific 1-glycoprotein, SP1)以及妊娠相关蛋白A(pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A)等。由于hCG具有极高的敏感性与特异性,而使其成为目前协助诊断妊娠体内是否有怀孕产物,绒毛分泌的绒毛膜促性腺激素是最为准确和可靠的检查早孕诊断方法之一。70多年前已发现孕妇尿液及血清中有怀孕后特有的绒毛促性腺激素。开始用动物如兔、大鼠、小鼠、青蛙、蟾蜍注射孕尿后检查动物尿中有无排精,后又采用免疫反应,至今用-hCG可精确的定量。绒毛膜促性腺激素是滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素,其分子量为46 000左右。一旦妊娠即可由血循环与尿中检出。hCG的相关分子组成了hCG分子家族。血中hCG多数以完全的形式存在,只有少数游离的和亚单位。而在尿液中起免疫反应的是hCG的代谢产物。利用hCG的生物学或免疫学特征,测定受检者体内有无hCG及其浓度的改变,即可准确的诊断早孕,已被临床广泛采用为妊娠试验。
一、尿hCG定性试验
目前国内多数采用试纸条,只能观察阳性或阴性。阳性敏感度为30miu/ml,可以作为定性试验,不能作为定量试验。
前面已提到尿中hCG为血的代谢产物,尿中的含量受多种因素,如喝水、尿量的多少等差异的影响。协和医院曾比较了近千例血与尿含量的关系,结果差异很大,未能找到相关规律,因而不能用尿中hCG为定量试验反映临床病情,只能用为定性试验,需要时进一步测血中的浓度,了解病情变化。
二、方法
    1.放射免疫分析法的测定原理,是根据抗原-抗体反应的特异性。两种同类型的抗原(一种是同位素标记的抗原,一种是非标记的抗原)与较低浓度特异性抗体竞争结合。例如:用未标记的hCG为一种抗原,和用同位素I125标记hCG的抗原,与一定量的特异性抗体竞争结合,如果标记的hCG与抗体量是恒定的,那么加入非标记的hCG量越高,则抗体结合标记的hCG量越小,抗原-抗体复合物上的放射性越低,反之如果加入非标记hCG量越少,则抗体上结合标记hCG越多,抗原-抗体复合物上放射性越高,只要把抗原抗体复合物,标记与非标记分离出来,那么可以看到抗原抗体复合物的放射性与所加入的非标记hCG量之间有一定函数关系,形成一条剂量反应曲线,根据这一原理用已知量的hCG作出标准曲线,亦可以测得未知血清hCG的含量。
    放射免疫试验具有灵敏度高、特异性强、准确性好的优点,但受同位素半衰期的限制,而且每次试验必须做标准曲线,所以不能每天都做样品或单一样品测定,给临床诊断带来不便。放射性废品处理需要特殊设备,严格保管,避免污染环境等问题。寻找非放射性标记的实验方法,达到检查的目的是较为理想的,酶免疫标记曾一度发挥作用,但也需做标准曲线且方法不够稳定,重复性不够满意,容易造成结果的偏差。90年代免疫荧光标记和化学发光法标记技术迅速发展亦可以达到全自动免疫分析测定的目的,从而避免了加样、温度等因素的误差,还能做单一急诊样品及批量试验,是灵敏度高、特异性强、准确性好、理想的分析方法。
2.1975年WHO颁布了第一国际参考制剂的标准IST IRP(75/537),1986年IST IRP经修改或为hCG的3rd IS,并成为最近使用的标准。 
三、血hCG的临床应用
绒毛膜促性腺激素(hCG)是滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素,一旦妊娠,绒毛产生的hCG即可由血循环中检出。在正常与异常妊娠期有一定的分泌规律,当胎盘排出后即迅速消失。滋养细胞的数量与hCG的分泌密切相关。因此血清hCG测定能在临床上诊断早孕、宫外孕、先兆流产、葡萄胎及滋养细胞肿瘤,而且在治疗后的随诊及预后中成为重要指标。以下介绍正常与异常妊娠期血hCG,用放射免疫法(RIA)的变化和规律。

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