mapan777：不知道哪位能告诉我IL-12、IL-12p40、IL-12p35、IL-12p70之间的关系是什么啊？

生命经纬网友qdwanfeng2007认为：

我也正想研究il-12，希望能和你共同探讨一下，P40和P35是P70的两个亚基吧？

生命经纬网友mapan777认为：

是的，它们联合起来起作用，我想做PCR，但是快被这个引物折磨死了，不知楼上是要做什么?

生命经纬网友qdwanfeng2007认为：

我想研究研究白介素12的抗肿瘤作用和机理，没大研究过PCR，可能帮不了你。是不是引物设计有问题？有时候引物设得不好，也不好扩增。没换个引物试试？

生命经纬网友qdwanfeng2007认为：

你是要做重组白介素12 吗？我挺想知道白介素12的抗肿瘤机制。很多文献上说是提高了细胞免疫功能，r干扰素分泌增多，提高了肿瘤细胞MHC和B7表达。你能和我聊聊这方面的问题吗？另外我还想知道，这种机制的验证方法。很感谢！

生命经纬网友cj_1968认为：

关于IL-12我以前看过不少文献，现在已经3年为接触这方面的文献了。现仅凭印象谈谈有关问题，如有错误，望各位指正。

IL-12是泛称通指IL-12p40、IL-12p35、IL-12p70，因此是一个很溶液混淆的概念。真正具有生物活性的IL-12是指IL-12p70，IL-12p70是由IL-12p40、IL-12p35两个亚基组成的，任何单体都没有活性。其中IL-12p35普遍表达于各类细胞，而IL-12p40主要表达于免疫细胞，因此有人认为IL-12p40有主要的免疫调节功能，其实这是错误的。在静止状态下，各种细胞中的IL-12p35是很微量的，在免疫反应时，IL-12p40可大量合成，而IL-12p35是严格控制的，因此对于具有生物活性的IL-12p70来说，IL-12p35是其限制因素，是调控免疫反应的主要因素。IL-12p70是启动Th1反应的关键细胞因子，DC在成熟的晚期和向T细胞递呈抗原的早期，DC可分泌具有生物活性的IL-12p70，IL-12p70可诱导Th0向Th1分化，启动细胞免疫，决定免疫激活还是免疫耐受。因此，IL-12p70在抗肿瘤作用和免疫激活中发挥不可替代的作用。

生命经纬网友cj_1968认为：

不知mapan777做IL-12的PCR是什么目的？如果检测IL-12的表达应该做ELISA，如果想重组IL-12p70我个人认为有相当的困难。首先，你用什么表达系统，如果用原核表达系统，则很可能是包涵体，不可能有活性，其次，两个亚基都表达成天然状态，如何合成IL-12p70，2各亚基之间是以何种方式连接的？

生命经纬网友mapan777认为：

肿瘤方向的我没有太留意，实在不好意思，如果有看见我再回帖吧，IL12应该是促进Th0向Th1发展的一个细胞因子，做ELISA确实是一种很好的方法，只可惜我们这里买抗体不容易，因此就想先通过RT拉一些条带看看，可惜它的引物总是设计不好，一直没有扩出来，不知道楼上兄弟能否帮忙，有没有做过的引物序列能共享一下吗？不胜感激啊！

急需啊！！

生命经纬网友cj_1968认为：

IL-12的ELISA试剂盒太容易买到了，有测IL-12p35，有测IL-12p40，也有测IL-12p70的。很少听到用RT-PCR或PCR来测IL-12的。mRNA高，IL-12p70就肯定高吗？首先，你的引物是IL-12p35的还是IL-12p40的？其次，从mRNA到蛋白涉及到翻译的效率、翻译后的修饰和分泌，我曾做过一个实验：mRNA增高17倍，蛋白表达量一点都没有增加。我感到你的设计科学性不高，实验的可靠性不强，没有说服力。

生命经纬网友mapan777认为：

实在也是无奈之举啊，我也明白这个道理，不过目前这个情况做RT是最现实的，否则就没得做了