BEAS-2B是SV40永生化的人支气管上皮细胞,我来讲讲其传代操作: 倒去或吸去(推荐)培养基,加入0.25%胰酶1ml,轻轻晃动培养瓶,使之分布均匀; 将培养瓶放于37度2分钟,镜下见细胞触角变钝,细胞变圆,吸去胰酶,加入2mlHANK'S液,晃动培养瓶终止消化,吸出HANK'S,加入D-HANK'S晃动后吸出,加入新鲜培养基弯管吹打成单细胞,按1:3传代,加入适量新鲜培养基后放入CO2培养箱。 BEAS对胰酶消化很敏感,时间控制很重要,经验不足时,宁愿消化不足也不能消化过。 BEAS细胞不能等到细胞长融合再传代,长到80%左右就可以传代了。 |
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