虽然文献上一般用DMEM来养HepG2，但我们一直用alpha-MEM，细胞状态比用DMEM好很多，而且一般不用补加谷氨酰胺。

细胞消化时，先用EDTA洗涤，再加1ml0.25%胰酶/0.01EDTA，镜下观察，这种细胞一般不会象其他细胞那样明显的收缩变圆，但约4分钟后，可在镜下看到细胞间隙增大，这时就可以终止了，吹打次数可以多些，否则细胞很易聚集成团生长，待镜下见大部分细胞散开后再去离心，等长到80% 左右时传代较好。