1、肿瘤细胞培养问题：

问：我养的肿瘤细胞，传多少代以后不能用、需要重新复苏新的呢？我总觉得细胞形态不好，但长的还挺快！

答：初代培养的细胞在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能维持二倍体核型，为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。如不冻存，则需反复传代以维持细胞的适宜密度，以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10-50次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停止。组织和细胞在培养中生命期如何，这要看细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况。如人胚二倍体成纤维细胞培养，在不冻存和反复传代条件下，可传30-50代，人胚肺成纤维细胞可传50代±10代，人胚肾只有8-10代，人胚神经胶质细胞15-30代等。而肿瘤细胞系多由癌瘤建成，多呈类上皮型细胞，常能传几十代或百代以上，具有永生性及异体接种致瘤性等特点，但随着传代次数的增多，细胞增殖也会逐渐缓慢，形态亦会变化。另外，看看你的培养条件是否严格按照该肿瘤细胞的要求进行，条件变了细胞亦会适应新的环境而发生改变。可试试用质量好的进口血清培养，看细胞长的如何。

2、HepG3B细胞问题：

问：HepG3B细胞是一种什么细胞？与HepG2细胞有何区别？听说是本身就有乙肝病毒感染的，请问病毒的基因型和血清型是什么？能分泌表面抗原和e抗原吗？需要加G418吗？

答：HEP-3B human hepatocellular carcinoma established from the tumor tissue of an 8-year-old black boy in 1976;description: cells contain integrated hepatitis B virus genome;cells were described to produce a variety of proteins,e.g. alpha-fetoprotein, albumin,transferrin,alpha2-macroglobulin,alpha1-antitrypsin,haptoglobin and others;patented cell line;this cell line has been assigned by the ZKBS (German Central Commission for Biological Safety)to risk category 2 confirmed as human with IEF of AST, MDH,PEP B.

Viruses:ELISA:reverse transcriptase negative;PCR:EBV-,HCV-,HIV-,HTLV-I/II-.

HepG2普通的肝癌细胞，没有HBV整合。HEP-3B 培养不用加G418。

3、顺铂的保存问题：

问：从肿瘤医院买来的顺铂注射液，拿来的时候没有避光，大约有2小时，我想请教一下：不避光2小时对顺铂影响大吗？还可以用吗？还有，我应该怎么保存，4度避光保存，对吗？利用顺铂研究细胞凋亡，应该怎么配制溶液，配好可以维持多长时间不失效？

答：不避光2小时对顺铂影响不大，可放到4度避光保存。可以用生理盐水配制成10-40μg(具体视实验而定)，可以放至少半年左右不失效。

4、HIT-T15细胞的培养问题：

问：请教HIT-T15细胞的培养方法，可以加入GETAMICINE等抗生素避免感染吗？请上传一些图片。在显微镜下会看到黑色的点，是不是被污染了呢？

答：在配制HIT-T15细胞培养基时，加入青霉素和链霉素两种抗生素就可以避免感染。显微镜下不应该看到黑点，典型的图片可以在ATCC的网上可以查看。

5、问：病毒的冻存和解冻的具体方法？

答：具体不知道，给一点资料希望对你有帮助吧！一些化学物质如甘油、蔗糖、谷氨酸钠等，能够减轻病毒在保存过程中其它理化因子对病毒的损伤，达到保持病毒的感染性、抗原性等生物活性：

(1)甘油——它是一种广泛使用的病毒保护剂，一般采用50%甘油盐水中，大多数细菌内杀灭但病毒却存活几十天、几个月、几年。

(2)二甲基亚砜——可以减少冷冻过程中微小冰晶的形成，因此对冻存的病毒有保护作用。

(3)病毒冻干保护剂——常用的有明胶、血清、胨、白蛋白、谷氨酸钠、葡萄糖、蔗糖等。它们对病毒的保护作用是多方面。如5-10%的糖类等低分子物质是通过使干燥样品的最终水分不致过低，防止蛋白质变性；而高分子物质则能促进病毒制品在冻干过程中的升华干燥，当冻干的病毒加水复原时，还能提高溶解性。

6、诱导培养基的问题：

问：最近养前脂肪细胞，需要诱导成脂肪细胞，关于诱导剂，有些问题想请教！

(1)诱导剂需要胰岛素和氢化可地松，去sigma的网站查了查，发现仅牛胰岛素就有6种，其中有两种写明用于细胞培养，应该用哪种药品？

(2)关于诱导剂胰岛素的配置说明中让用PH<2的冰醋酸配置，论坛中很多做过的朋友说用乙醇配置，是都可以么？会对后续实验有什么影响吗？

(3)诱导剂都是单独配置好浓储，保存在-20度里，用的时候现加到培养基中的吧(像单独加谷氨酰胺一样)？还是直接和培养基配置成诱导培养基，然后保存在４度里？

答：(1)I6634。(2)我们实验室用的是0.01M HCl配制的。(3)前者：个人认为每次用量比较少，没有必要配成储液，另外四度中诱导剂也比较容易被氧化(Mix)。

7、问：有没有人用5-氮-2脱氧胞苷干预细胞？哪个药是怎么配的？配好的溶液要怎么消毒？

答：此药叫地西他宾，我用于白血病细胞侏上，配完了用滤器过滤。

8、实验设计的问题。

问：流式细胞仪细胞自噬与细胞周期双参数分析：

(1)收获HeLa细胞5*105个；

(2)用4℃预冷的PBS洗2遍；

(3)然后用4%不含甲醇的甲醛冰上固定细胞15min；

(4)以PBS洗2次；

(5)80%冰乙醇固定，置-20℃冰箱过夜。固定细胞。

(6)用PBS洗两次；

(7)加入0.25%Triton-X100冰上放置5min；

(8)PBS洗2次；

(9)然后加入1%BSA处理30min，1200r/min离心5min，用1%的PBS100μl重悬细胞；

(10) 加入1%BSA稀释的兔抗人MAP1-LC3-Ⅱ(1:100)，4℃孵育过夜；

(11)再次日细胞用PBS洗3次后，加入FITC标记的羊抗兔IgG(1%BSA以1:100的比例稀释)，室温下避光孵育30min；

(12)PBS再次洗涤细胞后，用10μg/ml PI和0.1%RNase A室温下细胞核DNA染色30min，流式细胞仪检测，Cell Quest软件分析。

以上是我准备做流式的步骤请教各位高手对我的实验设计有什么看法？

请问：

(1)用Triton-X100对细胞破膜后对后面的用PI检测细胞周期有没有影响？

(2)由于想节省时间和经费我想在同一个样本(同一个流式管)中同时检测LC3蛋白和细胞周期不知道可不可行？

(3)我看到文献中FCM检测细胞凋亡率的方法(约1*106个各组细胞经质量浓度70%冷乙醇固定24h，PBS清洗，加1%RNase 37℃消30min。随后，用50μg/ml碘化丙啶(PI)(sigma 公司)4℃避光染色30min；流式细胞仪488nm激发波长测定细胞DNA含量。各组均测定10000个细胞，以DNA含量低于G1期的亚二倍体细胞(sub2G1细胞)为凋亡细胞。由流式细胞仪附带软件计算凋亡百分率。)

我看与我上面的方法差不多，我能不能同时检测一下细胞凋亡率？也就是说我的同一个细胞样本同时检测一个蛋白，一个细胞周期，一个细胞凋亡率这三个指标，不知道可不可行？

答：你的protocol，洗的次数太多，固定后的细胞比较脆弱，很容易弄破，用流式的方法检测细胞凋亡率，本身是有难度的，亚二倍体的峰与碎片峰很难区别。

9、问：如何检测呼吸爆发？有没有简便易行的办法？检测过氧化氢酶一般用什么方法？

答：流式细胞术，DHR123染色。

10、流式细胞检测中怎样避免消化的单细胞再度聚集的问题：

问：(1)我在试着做了一次流式细胞检测，先消化细胞(PBS+EDTA+EGTA)，然后立刻进行细胞计数，完毕后，发现消化的细胞又聚集在了一起(形成白色絮状物)，不知哪位也发现了类似的现象，应该怎样避免细胞再聚集？细胞的再度聚集是否和细胞长时间处于消化液中有关？

答：用枪多吹打几次，我做的时候也总是这样，怀疑是细胞太多了。

(2)在细胞计数后聚集、吹打，细胞数是不是不准确了？

答：不要消化太过，我是在50%细胞浮起后就轻轻拍打，燃后立刻终止消化，酶液加edta，建议新配，这样每次波动不大，心中有数。

11、如何去除死细胞的干扰问题：

问：我打算用流式细胞仪测成年大鼠心肌细胞内钙，fluo-3 负载。由于我的成年大鼠心肌细胞是用酶灌注急性分离而来，大家都知道急性分离成年大鼠心肌细胞非常非常脆弱，正常存活率也就在70%左右，再进过处理因素折腾相信死得更多，在这情况下我用流式细胞仪测10000个细胞，岂不是其中包括相当量的死细胞，请问各位是怎么避免死细胞的干扰的？

答：你可以在上流式之前用PI或7-AAD染色，它们可以透过死细胞的细胞膜将细胞染色，而活细胞膜完整，不会染色。这样在流式细胞仪上就可以通过染色去除染色阳性的死细胞，只要阴性的那部分。这样计数活细胞就应该会比较准确。当然7-AAD会优于PI，因为PI的细胞毒性会更大，而且在流式上的图形也不会像7-AAD漂亮。可以试试。

12、受试物的浓度和水溶性问题：

问：向大家请教受试物的问题：

(1)我采用是大鼠睾丸支持细胞，染毒的物质是有机磷农药，不溶于水。请问应采用什么样的有机溶剂作为溶剂，要注意什么？

(2)如何确定有机磷农药的染毒浓度？

答：可以试试DMSO，千分之一体积，不会影响细胞。eg.需要10uM的药液，用DMSO将药配成10mM的储备液，用的时候1000倍稀释。

13、血液中提取单核细胞后的保存问题：

问：我的实验是用流式细胞仪检测单核细胞上一个蛋白通道的表达量，由于血液标本条件的限制，每日收集标本量较少且时间分布无法确定，苦于没有单核细胞的保存方法就需要每日处理，请问有可以保存血液样本中提取出来的单核细胞，并且对细胞上表达的蛋白量影响较少的方法吗？

答：可以试下冻存，我曾经冻存过CD14＋细胞和间充质干细胞3个月左右，然后拿出来又上流式检测，除了复苏过程中会有少量细胞死去，不影响测相关表型。但是不知道冻存对于你要检测的蛋白有无影响，可以把冻存后复苏细胞和非冻存细胞分两组，上次流式加以比较，或者检索有无相关文献中这样操作。

14、MTT结果的问题：

问：最近我做了Hp作用GES后MTT，光镜下见未加Hp上清液组贴壁细胞明显多余其它各组，但是OD值却较小，请问这是什么原因呢？我加了MTT后，大概作用了3个半小时，是不是作用时间短了呢？

答：可能原因：(1)Hp上清与MTT反应影响了结果；(2)Hp上清在570nm吸光度有OD值。请做只加Hp上清的对照看看。

15、心肌细胞培养液浓度问题：

问：我想让心肌细胞长的快点，用20%小牛血清的IMDM培养液，请问会不会抑制心肌细胞的生长？

答：肯定会。

16、原代培养人卵巢颗粒细胞做转染的问题：

问：我正在原代培养颗粒细胞预对其进行基因转染，请问战友们有没有类似经验. 我的问题是：(1)细胞养的状态不好；(2)钓取基因PCR无结果；(3)目前还没做到转染这步。即使基因顺利从细胞或组织中钓出，我也担心细胞状态不行，没等转染就死了，实验无法继续，请多给意见。

答：原代的可以转的，你用的是脂质体么？推荐lipofetamin LTX或者R&D的Fegene，对细胞毒性温和一些。

17、内皮细胞原代的培养问题：

问：我养的不知道是不是内皮细胞，细胞好象比其他细胞小很多，而且似乎在血管里没爬出来，为什么？我用0.1%的白蛋白胶原酶37度消化30分，是不是消化不够.而且，内皮细胞原则上讲是应该灭活血清的，但考虑以下，觉得37度下补体可能就消除了，故用未灭活的20%FBS，这里是不是要求严格彻底灭活啊？生长因子我买了，但没用，考虑，即使不加因子，起码也该有细胞，只是长的好坏的问题，现在好象全军覆没哎，问题到底出在哪？请各位师兄师姐帮帮忙了，好郁闷啊，这两天都食不知味了，也许细胞养成养不成不好说，减肥是肯定会有成果的。

答：内皮细胞本来就很难养，刚刚长出来时和成纤维细胞差不多，胞体比成纤维细胞大，有突起。不知道是不是你消化的时间不够，血清是一定要灭活的，刚开始养建议加生长因子，等你养熟了再撤去生长因子。不要灰心，多试几次。

18、关于流式的问题：

问：我在做药物抑制肿瘤细胞方面的实验，在做流式的时候开始我是用MTT的细胞密度和铺板时间来决定加药时间，48小时候检测，结果高浓度组总是收不够细胞。请问大家再作相关实验的时候，大概让细胞长到多满的时候开始加药？

答：作流式最好用六空板作，种板时细胞数目不要少于1*106，24小时细胞贴壁后再加药，48小时候检测才能保证作流式时的细胞数量。另外，作流式和做MTT药量不是简单的换算关系，要根据预实验结果来进行。

19、Rhodamine 123会和羧酸物质反应显色吗？

问：离心收集经羧酸类物质暴露后的细胞，加入Rhodamine染色后，生成红色物质，是因为Rhodamine 与细胞或EP管内残留的羧酸物质发生反应了吗，此外，Rhodamine 还可能会和什么物质反应呢？如果发生反应了，结果还能用吗，有一组样品的流式检测结果随剂量有一定的趋势，这样的结果可用吗，能解释吗？

答：最好将Rhodamine 123和含羧酸物质如Fluo-3两种荧光试剂分别检测，因反应条件差别较大，结果影响较大，不能说明问题。

20、细胞毒实验的溶媒问题：

问：现在要做几个生物碱对一种细胞作用的实验，突然发现有几个生物碱不溶于DMSO，水和PBS，请问还有什么溶媒，或者还有什么方式来进行实验？

答：用丙二醇试试吧。

21、细胞转染后上清收集的时间问题：

问：我准备做瞬时转染，现有一问题很困惑：我是用磷酸钙法瞬时转染293T细胞，准备分12、24、36、48小时收集细胞上清然后ELISA检测细胞因子，可问题是转染试剂说明书上要求加入转染试剂4－16小时后吸去含磷酸钙沉淀的培基，加入2毫升(6孔板的用量)新鲜培基继续培养。请问我这不同时间段收集上清应该从何时算才对呢？是加入转染试剂后计时？还是换了培基后开始算？若是前者那后面三个时间段的细胞上清较12小时收集的还是有所不同呢？

答：应该从质粒转入细胞开始计算，后面只是个换液的过程。

22、caspase-3的检测方法问题：

问：在本版里有看到过有关caspase-3的检测方法：

(1)免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达，用悬浮的细胞；

(2)western blot 理想结果：caspase-3有32ＫＤ的条带外，还出现了20ＫＤ和10ＫＤ大小的条带，表明caspase- 3被活化；

(3)RT-PCR检测mRNA的表达，用凝胶成像分析系统处理，可以半定量。

请问是否有更详细一些的实验步骤？这3种方法之间有没有什么优缺点，那种比较容易出结果？

答：各种方法都有自己的优缺点，关键是根据实验目的选择适合的方法。

检测mRNA水平的表达，RT－PCR是广泛应用的比较好的方法；

检测蛋白水平的表达，可以选择免疫细胞化学，Westen－Blot等，前者可以在细胞内定位但定量效果不佳，后者操作比较复杂，如想在较高水平杂志发表论文最好选择此方法。检测Caspase－3活性还可以选用流式细胞仪来做，且可同时测定Caspase－8等的活性(多通路)。

23、HEPES(20mM)-Hank's(pH7.4)的配制方法问题：

问：请问低血清培养基的制备方法，是小牛血清。

答：hank's液就是hbss缓冲液，HEPES(20mM)-Hank's(pH7.4)应该就是指1L的hbss缓冲液里面含有20mM的HEPES。

你查一下HEPES的分子量，就知道怎么配了。低血清培养基，就是培养基里面加入的血清比较少，eg：我要配0.1%血清的培养基，就是100ml的培养基加入0.1ml的血清。

24、流式细胞的问题：

问：细胞用一抗包被后，然后再和二抗结合，不知道这样能否用流式细胞检测？由于我要检测的蛋白在国内外没有可用于流式细胞检测的现货，有个公司虽然可制备，但需要6个月，并且价格一个蛋白要5万元以上，时间和经费均不足，只好想想其它办法，不知道这样可否？

答：当然可以先用自己的一抗，再用荧光标记的二抗，不过非特异性会要高一点。

解决方法：摸索一下一抗和二抗的浓度，二抗千万不能加太多。洗涤步骤要严格，加完一抗和二抗后都要洗三遍，在EP管中进行，在96孔板里虽快，但非特异性会比较高；一抗冰浴30分，二抗冰浴20分钟染色。
 
25、JC-1测淋巴细胞线粒体膜电位问题：

问：我想用JC-1测外周血淋巴细胞线粒体膜电位，国内有文章说：

(1)用5ml注射器抽取适量肝素，再抽取患者静脉血2.5ml，PBS溶液稀释一倍，沿装有等量淋巴细胞分离液的试管管壁缓慢加至液面上层，保持两液面清晰，2000转/分离心20分钟，吸取单个核细胞层(中间白色层，含单核细胞和淋巴细胞)，加5倍PBS溶液，1000转/分离心5分钟，弃上清，得到淋巴细胞。再悬于含有10％热灭活的胎牛血清、1％青－链霉素、10mmol/L HEPES和1mmol/L谷胺酰胺的RPMI1640培养基中，37℃和5％CO2环境中培养24小时。

(2)检测线粒体膜电位(按JC-1说明书)：

a.取10-60万细胞，重悬于0.5ml细胞培养液中；

b.加入0.5ml JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育90分钟；

c.在孵育期间，按照每1ml JC-1染色缓冲液(5X)加入4ml蒸馏水的比例，配制适量的JC-1染色缓冲液(1X)，并放置于冰浴；

d.37℃孵育结束后，600g 4℃离心3-4分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞；

e.用JC-1染色缓冲液(1X)洗涤2次：加入1ml JC-1染色缓冲液(1X)重悬细胞，600g 4℃离心3-4分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入1ml JC-1染色缓冲液(1X)重悬细胞，600g 4℃离心3-4分钟，沉淀细胞，弃上清；

f.再用适量JC-1染色缓冲液(1X)重悬后，用流式细胞仪上机检测。流式细胞仪激发光波长用490nm，用一波长为527nm的通带滤器FL1-H检测绿色荧光，另一波长为590nm的滤器FL2-H检测橙色荧光，每样本至少计数105个细胞；

g.数据采集前以对照为基准调节光电倍增器电压使信号达一峰值，以平均橙色荧光强度对数值大于10部分百分比作为整体细胞线粒体膜电位的变化。数据采集后传送至电脑，最终由CellQuest 软件(Becton Dickinson公司产品)处理； 

请问分离淋巴细胞后不培养行不行？能不能直接加荧光染色剂染色？另外，国内哪个厂家生产的JC-1比较好用呢？

答：jc-1当然是MP公司(分子探针)啦，染色20-30min，再稳定10-20min(虽然我基本不稳定，不过染flu-3还是需要的，看细胞种类)，离心时间和转速要根据细胞类型来调整，做流式对细胞状态要求高，需要摸索。配染料，可加DMDO配初浓度，分装冷冻，再取一支用PBS稀释成使用浓度的100-200倍，再分装，冷冻，用时按需所取。

26、关于反复冻融法裂解细胞的问题：

问：用反复冻融法裂解的细胞，是贴壁的还是消化下来的细胞？很多资料上都写着－20度/37度反复冻融三次，但看到过一位生命经纬荣誉版主发的帖子说－80度/37度冻融一次就可以了，请问两者裂解效果有无区别哪，哪种更优？

答：冻融裂解细胞是为了得到检测需要的蛋白，细胞是否贴壁都可以这么做，我们采用的是液氮反复冻融三次，要求速冻速解，减少对蛋白活性的损伤。

27、2.2.15细胞的相关问题：

问：以前听说2.2.15细胞生长都比较缓慢，而且细胞成团，但是我们实验室的2.2.15细胞生长速度特别快，二传一基本一天就能长满，细胞不成团，类似HepG2细胞生长形态，不知道这样的情况是否正常？

答：我觉得第一种情况更像2.2.15细胞。我们实验室的2.2.15细胞也是细胞成团，生长慢，且不好养。建议通过RT-PCR，ELISA检测HBV几个重要基因的表达以确定你们实验室的细胞是否是真的2.2.15细胞。

28、关于cck－8的使用问题：

问：在使用cck－8检测细胞生长抑制率的时候，加完药了，在加入cck－8检查之前需不需要，换一下细胞培养液，再加cck－8？

答：如果你的药物不与cck－8试剂反应就不需要换，氧化性药物可能会有一定影响。

29、不同结肠癌细胞株之间的区问题：

问：请教不同结肠癌细胞株有何不同？各有什么特性？可以从什么书籍或资料能找到答案？

答：WiDr:Disease:colorectal adenocarcinoma Antigen Expression：HLA A24,A32,B15,B18.

COLO 320DM:Disease:colorectal adenocarcinoma Comments:The line is negative for CEA, CSAp and colon antigen 3.The cells are weakly positive for keratins and vimentin.

COLO 320HSR[COLO 320 HSR]:Disease:colorectal adenocarcinoma Comments:CEA,negative.CSAp, negative.Colon antigen 3,positive.The cells are weakly positive for keratins and vimentin.

更多请查看ATCC搜索后的网址，共有近20余种结肠癌细胞株及相关特性描述。

30、问：我想TUNEL法检测细胞凋亡，哪个公司的产品比较好？

答：当然是进口的好，但如果你做动物的话武汉博士德的比较便宜合算，做人的话国产迈新的也挺好。

31、概念性问题：

问：请教一下概念性的问题：胃黏膜上皮细胞、胃上皮细胞、上皮细胞之间的包含关系？或者其中两者是等同的？

答：全部胃粘膜表面(包括胃小凹表面)均覆以单层柱状上皮。上皮细胞能分泌粘液，可在粘膜表面形成粘液－碳酸氢盐屏障(后述)与胃粘膜屏障(后述)共同起重要保护作用。这里得胃黏膜上皮细胞和胃上皮细胞其实是等同的；上皮细胞的概念就大了。

32、小鼠脾T细胞的培养问题：

问：(1)正在进行小鼠脾T淋巴细胞培养，发现长得很慢，想问：用哪种进口胎牛血清要好一些？我用了CD3、CD28抗体，IL-2用多少单位比较好？

答：小鼠脾T淋巴细胞是终末分化细胞长的当然很慢，血清的话用进口的和国外的都可以。但要先实验，有些进口血清对T淋巴细胞增殖有影响。CD3、CD28抗体用5－10µg/ml的量包被96孔板然后作用。IL-2浓度为10-30ng/ml，不同公司的产品不同，要摸索一下条件，最好找一篇文章，然后跟它买一样的产品，来做。

问：(2)我培养的是调节T细胞。回答中“有些进口血清对T淋巴细胞增殖有影响”是指什么？你说IL-2浓度为10-30ng/ml，是根据你的经验，还是文献记载？我查了很多文献，有用人的IL-2，有用鼠的IL-2，用鼠IL-2的浓度差别太大，从2ng至30ng都有。我用的是peprotech公司的。

答：某些进口血清或是某些产品的某些批次会对T淋巴细胞增殖有影响，可能出现不增殖的结果，有些淋巴细胞细胞在里面长不好，甚至死亡。血清成分太复杂，原因不好说。整个实验最好使用同一批血清，在用前，先预实验(可以用丝裂原做非未处理的细胞)确定没问题，再用。国产血清也是一样。剂量方面我做的主要是PBMC或是脾细胞，没有进一步分选，不加IL-2。上面的主要是从文献上看的。

33、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)测试盒的相关问题：

问：(1)南京建成的抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)测试盒能做破骨细胞爬片染色吗？

答：从TRAP染色的原理上来说应该可以，但是由于其中好多试剂只有编号，很难对应试剂化学名称，对操作来说是个问题，sigma试剂盒相对较贵，我现在购买了副品红和萘酚AS－BI磷酸盐等试剂，打算自己建立染色方法。

问：(2)sigma试剂盒的具体名称呢？

答：Acid Phosphatase Leukocyte kit，Procedure No. 386A or 387A。