将用等体积生理盐水稀释的抗凝血,加入塑料离心管中的Ficoll Hypaque分离液表面,以450 g离心25min收集单个核细胞,用10 小牛血清的RPMI一1640培养液悬浮细胞,置于6x 6 cm 玻璃培养皿中,在5 %CO2 、37℃ 下孵育2 h,收集贴壁的单核细胞。 用0.2 乳白蛋白的RPMI一1 640培养液悬浮单核细胞,Wright染色计数单核细胞>95%,调整细胞密度为4×10。/m1。将细胞悬液加入24孔培养板中,在5 %CO2,37℃ 下培养24 h,离心收集上清液,冻存于一7O℃ 冰箱中备用。细胞培养前后台盼蓝染色法测定细胞存活率。 |
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