生命经纬知识库 >>所属分类 >> 细胞生物学技术   

标签: 293-T细胞 293细胞 细胞培养

顶[0] 发表评论(30) 编辑词条

培养293细胞应注意以下几个方面:

1.用1640加10%胎牛血清,有的种系用DMEM.血清要求质量较高,在普通血清中细胞生长不太好。1640用双蒸水溶解,按说明加入碳酸氢钠。

2.培养液中应加入HEPES,起缓冲pH值的作用,否则会影响细胞状态。如果用20%的HEPES,每次配培养液时每200ml培养液可加入5ml.加入HEPES后1640培养液颜色略呈橘黄色而非暗红色。

3.消化所用胰酶可选择0.125%浓度,且不要消化时间太长。也有研究者认为不用胰酶,直接吹打使细胞脱壁,但使用胰酶效果较好。消化时在镜下观察到细胞形态稍有变化即可,不要等形态明显变化后再停止。可以不用加血清终止消化,只要将胰酶倒出来,加上培养液吹打即可。

4.传代密度不宜过高也不易过低,一般1瓶传3瓶可能比较合适。

5.培养液应该适当偏酸性,在7.0-7.2之间比较好。一般加上HEPES后,pH值是不用调的。

6.细胞代数越高生长越快,同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。

7.传代时细胞密度在80%左右比较好,如果超过90%融合再传会影响细胞状态。

附件列表


→如果您认为本词条还有待完善,请 编辑词条

上一篇细胞增殖的检验方法:酸性磷酸酶法 下一篇确定G418最佳筛选浓度用什么细胞

词条内容仅供参考,如果您需要解决具体问题
(尤其在法律、医学等领域),建议您咨询相关领域专业人士。
0

收藏到:  

词条信息

admin
admin
超级管理员
词条创建者 发短消息   

相关词条