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标签: 转染后 Western 检测

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【求助】转染后Western检测不到高表达量的目的蛋白

以前用GFP和连有目的蛋白片段的质粒共转染(瞬时),GFP可以看到,转染效率也不错。western能检测到目的蛋白。

随后做稳定转染,用G418筛选,重复两轮,筛出的细胞用同样的步骤做western,就检测不到目的蛋白的表达。瞬时转染和稳定转染用的是同一次提的质粒。

很奇怪,请有经验的战友帮我分析下!

DXY721认为:

瞬时转染可以检测到,稳定转染检测不到,这是很正常的,说明你的目的基因没有稳定整合到基因组中或者是整合到基因组里,但是插入的位置不对,不能稳定的表达目的蛋白。

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