goingba网友的观点：

悬浮细胞最好养，不用消化，关于几天离一次心，要看你的细胞生长状态了，我养过血液肿瘤细胞，增值比较快。我一般是第二天半量换液（加等量培养基后一分二），第三天若长得比较满，就离心换液。若你不想每天都去管它，你可以把细胞密度中的相对稀一点（不能太稀，太细了细胞不好好长），可以2-3天换一次液（半量，不用离心），这要看细胞状态，和你试验进度，若你急着用细胞，那就将细胞中密一点，天天换液，用胎牛血清，这样细胞会疯长的。要是比较娇气的细胞，象RPMI-8226，一定要用胎牛血清，2-3天半量换液，依据细胞状态再离心换液，等细胞进入对数生长期了，养起来也就好养了。若是正常人T细胞，也要3-5天换一次液，最好3天的时候加入些新培养基，我曾经有一次1周忘了换液（因为T细胞增殖很慢，或者说在体外不给刺激基本不增殖，所以培养基的颜色不发生改变，但他也消耗营养），最后作流式发现细胞大部分凋亡和死亡了。

悬浮细胞培养方法心得大家谈

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