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标签: 生物芯片 共聚焦 分辨率 信噪比 灵敏度

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摘要:

介绍一种采用双波长(532nm和635nm)激光器作为激发光源,基于激光共聚焦原理设计的生物芯片扫描仪。它采用一个光电倍增管分时实现cy3与cy5两种荧光信号的检测。生物芯片的横向扫描由远心f-θ扫描物镜与振镜实现,纵向扫描由步进电机驱动精密导轨实现。分析了激光扫描光路及光电倍增管对生物芯片扫描仪的分辨率、信噪比及灵敏度的影响.实验结果表明,本扫描仪的分辨率可达到5μm,信噪比高达103,检测灵敏度最高为1fluor/μm2,扫描速度快,cy3与cy5之间串扰小。

生物芯片(biochip)是20世纪90年代中期发展起来的一项尖端技术,它以玻片、硅片或尼龙等为载体,在单位面积上高密度地排列大量的生物材料,从而实现一次试验能同时检测多种疾病或分析多种生物样品的功能。生物芯片可广泛应用于药物研究、疾病诊断、基因结构与功能研究等领域。

生物芯片采用分子杂交原理进行工作,其基本做法是将要检测的样品加以荧光染料标记,然后与已知结构的生物芯片进行充分杂交,再加以洗脱后,用生物芯片扫描仪获得发生杂交反应位置处的荧光信号,并以图像形式显示出来。生物芯片扫描仪可分为基于光电倍增管(PMT)的激光共聚焦扫描仪和基于电荷耦合器件(CCD)的面扫描仪两种。激光共聚焦扫描仪的激发光源多采用绿色532nm和红色635nm的激光器,荧光标记染料多为cy3和cy5。

本文提出一种新型的激光共聚焦生物芯片扫描仪,它的二维扫描装置由光学扫描与机械扫描相结合来实现。其中生物芯片的横向扫描由远心f-θ扫描物镜与振镜实现,纵向扫描由步进电机驱动精密导轨实现。cy3与cy5的荧光信号由一个PMT分时检测,消除了两种信号之间的串扰。并且分析了影响该扫描仪的分辨率、信噪比及灵敏度的因素,给出了实验结果。

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