一、空中定位(设置针) 用两个4X物镜 1、拿一个空的皿,轻轻在上面划交叉线。 2、放置这个盘在显微镜载物台下,并移到中心。 3、选4X物镜(无座,或低4X物镜),聚焦交叉线在表面(在这“10个步骤”中不需要再调显微镜聚焦钮!!)。 4、选4X物镜带座(或高4X)。 5、全部升高有黄/黑颜色杆,将针嵌入到左边HOLDER,再将它放入PAR21(左边)。 6、对中心,将控制杆(红色)B、C放在中间位置。B在下面为X、Y、Z方向微调,C在上面为X、Y粗调;同时Z轴方向,即上、下方向的微调放在中间。 7、将针调进显微镜视野,可调HOLDER前进驱动钮“E”,和PAR21顶上粗调(升高、降低钮)“F”。如必要调“C”,调“B”。检查针是否一条线,可旋转HOLDER持针器上的“G”。 8、选择4X物镜(不带座),这时交叉线仍在被聚焦面。 9、全部降低(黄/黑)杆,将针进入视野,并稍微高于盘的表面,如果发现针重复太高,或太低可调整“H”。平时要保证针稍高于盘的表面,仅需调B(“B”——为X、Y、Z微调)。 10、重复上面步骤,调injecting针。 二、微针气路平衡 (仅对injecting针进行,千万不要对Holding针进行) 选一个干净、单独皿,不能有油覆盖在上面。 方法一: 1、放入一大滴PVP在盘的中心(不要用油)。 2、旋转rotator顺时针,直到全部降下。 3、压下“E-button”钮。 4、用显微操纵仪降低针进入media/PVP介质滴里。 5、旋转SAS反时针(向上)大约75%(75mm)。 6、保持平衡大约5分钟,PVP上升进入针的不可拉处。 7、压下“E-button”不放松,旋转SAS顺时针(向下)大约25mm。 8、举高针换皿。 |
方法二: (本方法前四步同方法一,仅从第五步开始区别) 5、旋转SAS反时针(向上)大约4~5个圈。 6、保持平衡对PVP三分钟,对培养液4分钟。如使用PVP,建议PVP浓度不要太浓,最好ㄑ7%或直接在培养液中进行平衡。 7、压下“E-button”,并松手,等两分钟。 8、旋转SAS顺时针(向下)大约3~4圈,等三~四分钟,一般液体自己会到针的前端。 9、必要时可顺时针或反时针调整,直到针前端为您需要的液体长度。 10、举高针换皿。 注意: 1、用手动控制roatator当injecting针内液体开始移动时,手的动作这时要慢。 2、重新装针,应先放气(注意安全,装针的方向不要对着人)。 3、应用新针进行练习,直接从气路平衡、制动精子、吸、吹精子等操作连贯进行,这样容易找到感觉,上手快。这样看似浪费但比先用旧针制动,再用新针或旧针进行气路平衡、吸、吹精子效果好。 4、我们不建议用旧针练习,但如果要用旧针练习,请一定注意不要将针内油、液体吸入气路管子内。 三、维护 1、概述 (1)不使用时,如果定期使用防尘盖保护仪器就没有必要再进行维护。 (2)必须迅速去除液体或灰尘,也就是说要保持仪器清洁。 2、电动仪器 (1)洒出的液体:禁止弄湿电动仪器。如果水不小心洒在上面,在主菜单上把电源关闭,然后迅速擦干仪器。 (2)保险丝:必须用新的合适功率的保险丝来替换损坏的保险丝。 3、显微操纵器 在仪器的安全轴承上面大量地使用润滑剂,因此,没有必要进行定期的维护。由于使用了轴承环,在每根控制杆底部的球形轴承都不需要润滑剂。然而,我们建议每六个月调节紧固螺丝一次。 如果溶液被洒落在仪器上面,或者原始的润滑剂受到污染或者已经被清除掉,线性滑珠就需要用优质的二硫化钼油脂(例如Rocol或类似的物质)来润滑。 |
四、故障处理 1、注射器内油达到了微吸液管的顶端了吗?(仅用于充油系统系统) 更换微吸液管——油不能从顶部抽出——当往工具柄嵌入微吸液管的时候不允许油到达顶部。 2、系统里有污油?(仅用于充油系统系统) 更换聚乙烯管道和矿物油。 3、你已经使你的注射微吸液管平衡了吗?(仅用于充气系统) 平衡注射吸液管——使用SAS11/2-E空气注射器(注意:仅对INJECTING针进行,不要对HOLDING针进行。选一个干净,单独皿,不能有油覆盖在上面;总行程约100mm)。 (1)在有盖培养皿中间滴入一滴相当大的PVP。 (2)顺时针方向旋转SAS控制器(也就是向下)。 (3)按旋转器上部的平衡键。 (4)使用显微操纵控制装置把微吸液管放到PVP液滴里。 (5)逆时针旋转SAS(向上)大约75%的位移 (6)放置5分钟左右使其平衡,PVP应该把微吸液管提升到几乎达到微吸液管的不可拉柄处。 (7)顺时针旋转SAS时继续按动平衡键;在注射过程中保留约25%的位移用于调整。 4、故障:不能吸气/注射 解决:是微吸液管顶端堵塞了吗? (1)如果你的装置带有SoS Sonic Sword,将微吸液管从样本取走,通过注射器的正压,从SoS施加脉冲,那么就可以把堵塞吸液管的污垢去掉。 (2)用新的微吸液管替换。 5、样品变干了吗? 温和加热可以蒸发干未受保护或者保护不足的样品。在样品表面有3mm厚的矿物油层可以防止样品变干。 6、吸液管仍然堵塞?你所使用的化学药品/媒质还在保存期内吗? 在使用或运输过程中,如果过了保存期限仍然保存,或者保存的时候没有冷藏,一些媒质和溶液就会变质,尤其是含有血清的时候。 7、注射器系统会漏气吗? (1)检查微吸液管架是否完全密封。 (2)检查硬胶管道与微米注射器的连接。如果连接松脱,把管道截断1cm左右然后重新连接。 (3)检查硬胶管道与工具柄的连接。如果连接松脱,把管道截断1cm左右然后重新连接。 (4)检查微吸液管架“管口”里的O形环——参考手册说明来更换。如果O形环由于长期使用而损坏就需要更换。 |
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