摘要:原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中,制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白[阅读全文:]
摘要:Kitto Lab, The University of Texas at Austin http://research.cm.utexas.edu/bkitto/Kittolabpage/Protocols/Microbiology/electroporation.html This procedure prepares glycerol stock cultures of bacteria f[阅读全文:]
摘要:基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克[阅读全文:]
摘要:我做了稳定转染,从G418浓度确定到最后的单克隆化鉴定。有自己的体会也有其他战友遇到的情况,和大家分享. 没有总结好的地方,大家补充。筛选之前确定G418浓度: 1.由于每种细胞对G418的敏感性不同,而且不同的厂家生产的G4[阅读全文:]
摘要:前一阵子一直在做双酶切质粒重组,失败了很多次,不过很快改善了 实验方法,用2周重组了14个质粒。现就自己的体会,结合生命经纬战友的宝贵经验,谈一下质粒重组的一些个人经验。1、回收PCR产物: 在进行PCR扩增时候,给引物两[阅读全文:]
摘要:近年来抗性基因研究的突破性进展、抗性基因的克隆和序列分析所揭示的其编码蛋白的组成、拓扑学和亚细胞定位等特征,为揭开抗性基因的作用特点提供了线索。一般来讲,基因克隆的策略可分为两种:正向遗传学途径和反向遗传学[阅读全文:]
摘要:Does anyone have expereince of extracting DNA from urine? I am having problems with this. I have previously extracted the DNA but then it degraded very quickly and since then I havent even been able t[阅读全文:]
摘要:1 概 述核酸的分子杂交(molecular hybridization)技术是目前生物化学和分子生物学研究中应用最广泛的技术之一,是定性或定量检测特异RNA 或DNA 序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的碱基互补原则而发展起来的。在碱[阅读全文:]