摘要:一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细[阅读全文:]
摘要:一、流式细胞术常规检测时的样品制备1、直接免疫荧光标记法取一定量细胞(约1X106细胞/ml),在每一管中分别加入50μl的HAB,并充分混匀,于室温中静置1分钟以上,再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标[阅读全文:]
摘要:一、形态学检测(一)光学显微镜和倒置显微镜 1、未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 2、染色细胞常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞[阅读全文:]
摘要:线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在,使一些亲脂性阳离子[阅读全文:]
摘要:由于可溶性MHC单体分子与TCR的亲和力很低,解离快,而多价分子可与一个特异性T细胞上的多个TCR结合,使其解离速度大大减慢。为此Altman等提出借助生物素—亲和素级联反应放大原理构建MHC I类分子四聚体。该方法通过[阅读全文:]
摘要:细胞凋亡的检测方法,从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。一、早期检测1、PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测2、细胞内氧化还原状态改变的检测3、细胞色素C的定位检测4、线粒体膜电位变化的检测二、 晚[阅读全文:]
摘要:钙离子是机体的重要元素,同时作为细胞内第二信使通过与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)结合激活多种蛋白激酶(如腺苷酸环化酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶等)及诸多蛋白水解酶和核酸酶,从而参与包括细胞代谢、细胞周期等多种细[阅读全文:]
摘要:DB(TM) DimerX reagents are MHC-immunoglobulin fusion proteins, developed to detect antigen-specific T cells. Among the MHC multimers, dimer (BD(TM) DimerX) and tetramers are the only commercially avai[阅读全文:]