摘要:下游应用为基因筛选、测序、突变检测和分子诊断等等的用户，对PCR保真性要求很高。 降低PCR扩增的错误率可以通过使用各种具有高保真性的DNA聚合酶来实现。 DNA聚合酶的保真度用错误率来表示，包括碱基错配率、PCR产物突变百[阅读全文:]
摘要:在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列，TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR，能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR[阅读全文:]
摘要:分子生物学技术正以惊人的速度发展，特别是近20年来已经成为生命科学的一个主要的生长点。1976年cDNA克隆技术的建立，使分子生物学更加迅速广泛地渗透到医学各学科，发展了各学科的分子理论基础。1985年Mullis首先描述的[阅读全文:]
摘要:PCR(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤：(1) 变性(Denature)：目的双链DNA片段在94℃下解链；(2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与[阅读全文:]
摘要:聚合酶链反应-单链构象多态性分析（Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products, PCR-SSCP）是近年来发展起来的一种基因分析方法。PCR-SSCP分析的基本程序为：首先PCR扩增[阅读全文:]
摘要:（一）材料与方法 1. 生物素标记特异性抗体的制备免疫球蛋白（如IgG、IgM）的Fc片段上有糖基存在，因而可用能与糖基结合的Biotin-hydrazide作生物素标记。（1） 将纯化的抗体（IgM或IgG， 0.1~1.0ml）在标记缓冲液（0.1Mol/L NaAc[阅读全文:]
摘要:1)克隆PCR产物的最优条件是什么？ 最佳插入片段：载体比需实验确定。1：1（插入片段：载体）常为最佳比，摩尔数比1：8或8：1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保[阅读全文:]
摘要:免疫-PCR技术结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高敏感性，是一种极为敏感的抗原检测技术，并适合于各种微量抗原的检测。 荧光标记、酶标记和放射性同位素标记这三大抗体标记技术是目前免疫化学、免疫学以及分子生物学中[阅读全文:]