摘要:吸弃原培养液PBS洗一两次加入400ul0.125％胰酶（原代最好加0.05% EDTA）消化转动培养盘，保证整个盘面都被trypsin液润过吸弃trypsin后37度消化3min-->以完全培液（DMEM+10% FCS＋1/1000Biotin+1/1000泛酸钙-->吸打（枪的吸[阅读全文]

摘要:RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢，普通的方法根本就不可能将它消化下来，这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得，简介如下：消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，实验前加温到37度以50ml培养瓶为例：1[阅读全文]

摘要:RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢。我的操作如下：实验前将DPBS及DMEM加温到37度使用Flask75培养瓶：1、细胞贴壁生长，长满瓶底70％时，弃去培养液，加DPBS10ml漂洗 一至两次；弃去2、 加入10mlDPBS,然后用[阅读全文]

摘要:1) 细胞消化液的配制及存储：我采用的是0.25%Trypsin+0.05%EDTA的消化液，BUFFER采用的是D-Hank's液。配完后分装成4-5ml/tube，于-20度冰箱中储存。2) 消化前的处理：当细胞生长至亚融和状态需要传代时，提前半小时将配好的[阅读全文]

摘要:腹腔种植小鼠肝癌H22细胞后第5-7天时，将小鼠颈椎脱臼处死，于75%酒精浸泡1-2分钟或腹部消毒。于无菌条件下用5 ml 7?号针头注射器抽取腹水，并置于10～50 ml离心管内，用生理盐水(NS) 10倍稀释，吸管充分吹打均匀，1 000 r/m[阅读全文]

摘要:小鼠Lewis肺癌体内传代的详细步骤：小鼠右腋窝皮下接种小鼠Lewis肺癌实体瘤后第16天左右时，将小鼠颈椎脱臼处死，于75%酒精浸泡1-2分钟。将小鼠置超净工作台，于无菌条件下，剥取瘤块并将瘤块置200目细胞筛用玻璃棒研磨后[阅读全文]

摘要:原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠，断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min（虽有头部皮肤保护，但时间不要过长，所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠）。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨，刮除骨膜和结缔组织，DMEM[阅读全文]

摘要:1、传代前24h先将组织块去除：等到细胞覆盖瓶底80％以上后进行组织块去除操作。可用弯头玻璃吸管将组织块轻轻挑起吸出，确保无组织块留下，以防坏死污染。2、胰酶消化：倒掉旧培养液，用D－HANKs液清洗两边，加入已预热（37度）10m[阅读全文]

摘要:用M16做成熟培养液,Sigma有成品。配方也很简单，你上sigma的网站搜一下就能找到，相关的书上也有。我感觉这个培养液不错，以前自己也配过，但好像不稳定，没有成品好。曾有人推荐我用CZB，效果也很好，不过我没用过。配方也很简[阅读全文]

摘要:混合胶质细胞培养来源于1-2天的大鼠，如同星形胶质细胞培养，有轻微的改动。乳鼠断头后大脑收集在DMEM-Ham‘s F-12含有1%抗菌素的溶液中。除去脑膜，血管和白质后，用机械匀浆法将大脑皮层匀浆，然后将细胞悬液依次通[阅读全文]

摘要:问：小分子水溶性γ位的氨基酸酯如何水解？如何显色？如何析出固体？谢谢！答：是谷氨酸吗？1）甲醇/NaOH水溶液，或THF/NaOH水溶液皂化。2）水合茚三酮显色。3）等电点水/甲醇重结晶。答：甲醇溶解，加入过量1N NaOH搅拌，监测原[阅读全文]

摘要:1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代2 、体外分化培养基：包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的[阅读全文]