摘要:问:我要配不同浓度的胰蛋白酶加到细胞里面观察MTT值,请问用什么浓液配啊?可不可以用完培,我怕里面的血清会影响胰蛋白酶的作用。请各位前辈指点,谢谢! 答:血清肯定会影响胰酶的作用啊。不可以用无血清的培养基吗? [阅读全文:]
摘要:问:有人说白颜色胰蛋白酶的要比黄颜色的效果好,是吗?我近期买的胰蛋白酶倒是白颜色的,但是不能溶解在PBS中,呈细小的悬浮颗粒状,是GIBCO公司出产的。这会是什么原因呢?望各位师兄师姐回复。 答:以我们的经验确实是这样[阅读全文:]
摘要:问:木瓜蛋白酶和胰蛋白酶在消化组织块上有什么区别吗?哪一个效果更好?答:常用的细胞消化液为胰蛋白酶(Trypsin),其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接,使组织或细胞片分散成单个细胞,制[阅读全文:]
摘要:问:我购买的是GIBCO 0.25%(w/v)胰蛋白酶(25200-072)如何稀释成0.1%(w/v)?答:用D-Hank,s液按一定的比例配置即可。答:那要看你平时用什么缓冲液了。pbs,还是D-hanks?用你平时的那种缓冲液就行了。 [阅读全文:]
摘要:问:蛋白酶底物Glt-ALA-ALA-phe-MCA,加入酶反映完毕后,需要用到excitation wavelength and emission wavelength, 高手能否解释一下,多谢。答:你需要用两个波长,一个是激发波长,一个是释放波长,激发波长是用来激发酶反[阅读全文:]
摘要:问:我想买胃蛋白酶/胰蛋白酶/蛋白酶k/蛋白酶e; 用做我提取物质的蛋白属性验证,即让它与之作用后看有没有活性,如果活性降低则它可能是蛋白,我的问题是,请问:这几中酶的详细配置方法?性质介绍,其作用位点是?贮存方法?[阅读全文:]
摘要:问:请问各位高手,我想让酵母蛋白酶A失活,决定采用PCR进行DNA序列的突变,此法行的通吗?可有前人研究过? 答:国外有了"蛋白酶缺失"的用于重组蛋白表达的菌株。国内也许也有,小龙对于上游不大懂,不知道自己构建蛋白酶缺失[阅读全文:]
摘要:问:我在蛋白方面比较菜,我有个蛋白需要做酶切,蛋白表达主要是以包涵体为主,溶解在8mol/l 尿素,或者1%SDS中,蛋白已经变性了,请问蛋白酶切是否能在变性的条件下酶切,还是一定要等到蛋白复性以后才能酶切? 还请指点一二[阅读全文:]