摘要: (1) Core out a single, well separated plaque from the agar plate using a 200µl pipette tip and place it into 500µl of SM buffer in a 1.5ml microtube:SM buffer5.8g of NaCl 2.0g of MgSO4.7H[阅读全文:]
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摘要:PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备②引物的质量与特异性③酶的质量④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上[阅读全文:]
摘要:We routinely produce dsRNA by in vitro transcription of a PCR generated DNA template containing the T7 promoter sequence on both ends (I. Primer Designed dsRNA). It is also possible to produce dsRNA u[阅读全文:]
摘要:PCR-SSCP分析的基本程序为:首先PCR扩增特定靶序列,然后将扩增产物变性为单链,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,DNA单链的迁移率除与DNA链的长短有关外,更主要的是取决于DNA单[阅读全文:]
摘要:平端连接 通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分[阅读全文:]
摘要:一、条带宽不超过1mm,边缘整齐;二、条带在期望的碱基大小之内;三、背景上无smears,也无引物二聚体的出现则是PCR扩增失败,而非阴性反应;四、如果出现期望的碱基大小之外的其它条带,不管是否有期望大小的条带,均应作为人工[阅读全文:]
摘要:末代沙皇尼古拉二世、1918年的流行性感冒病毒、电影《侏罗纪公园》,以及辛普森杀妻案,这四件事情到底有什么相关?答案是没有。只不过近十几年来生物技术的一项新发明,把它们给连在一块了。这项技术就是“聚合酶链反应&[阅读全文:]