摘要:引物设计的总原则就是提高扩增的效率和特异性。由于影响引物的设计的因素比较多,所以常常利用计算机来辅助设计,通常都用PCgene软件中PCR 引物设计程序来帮助设计。 本篇文章来源于网络,如有异议请联系我们,我们将在3个[阅读全文:]
摘要:RNA 干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA (double-strandedRNA,dsRNA) 引发的转录后基因静默机制。其原理是:RNaseIII 核酶家族的Dicer,与双链RNA 结合,将其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干扰RNA (small interfer[阅读全文:]
摘要:化学合成的siRNA 与生物合成siRNA 相比,有以下优点:?操作简便,研究人员得到合成好的siRNA 后,进行简单的稀释处理即可实验。?转染效率高,相对于分子量较大的DNA 质粒,其转染效率高。?对细胞的或者组织的毒副作用小。?可[阅读全文:]
摘要:本文介绍腺病毒、慢病毒载体、逆转录病毒、腺相关病毒4种病毒包装siRNA的优缺点、原理和包装实验流程。[阅读全文:]
摘要:将制备好的siRNA、siRNA 表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种:磷酸钙共沉淀;电穿孔法;DEAE-葡聚糖和polybrene;机械法;阳离子脂质体试剂。目前用的最多的是阳离子脂质体法。[阅读全文:]
摘要:实时荧光定量PCR(Real Time PCR,qRT-PCR)避免了传统PCR 以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。与常规PCR 相比,实时荧光定量PCR 具有特异性更强、有效解决PCR 污染问题、自动化程度高等特点,已成为国际公认的核[阅读全文:]
摘要:Western Blot 印迹法是把通过电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持物,通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白的抗原表位发生特异性反应进行检测。Western Blot 既可以定性,又可以半定量,是初步鉴定靶蛋白表达的[阅读全文:]