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Southern Blotting(Fred Hutchinson Cancer Research Center)
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
标签: Southern Blotting

摘要:DNA Transfer1. Depurination of DNA fragments: Wash gel in 0.25 M HCl 5' (small gels), 7' (large gels)2. Denaturation: Wash gel in (0.5 M NaOH, 1.5 M NaCl) for 20' (small) to 30' (large).3. Neutralizat[阅读全文]

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SOUTHERN BLOTTING OF GENOMIC DNA
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
标签: Southern Blotting

摘要:1.Digest DNA: • 1.5 μg DNA in a 25 μI reaction containing BSA• 3 to 5 units for 5 to 3 hours (aim for 10-fold overdigestion; remember many enzymes will not survive well for more than 3[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
标签: Southern Blotting

摘要:【原理】Southern 印迹是将电泳分离的 DNA 片段转移到一定的固相支持物上的过程。DNA 分子经限制性核酸内切酶酶切,经琼脂糖凝胶电泳将得 DNA 片段按分子量大小分离,然后将含 DNA 片段的琼脂糖凝胶变性,并将单链 DNA 片[阅读全文]

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Southern Blot Analysis(from Baker lab, university of Florida)
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
标签: Southern Blotting

摘要:DNA PrepPrepare DNA via your favorite method.You may find a protocol underMini Yeast Genomic Prep.Restriction Digest1.Digest DNA with appropriate restriction enzyme.Digest 10μg of Yeastchromosomal [阅读全文]

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SSC-Molecular Biology
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
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摘要:Hi,Can you tell me what do "SSC" in a southern blot, how he act on DNA or in the protocole.(excuse-me for my traduction, i never write in english)-Sebela-"SSC" is a abbreviation of sodium chloride and[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
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摘要:1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs.2. Photograph the gel with a ruler adjacent to the molecular weight markers as a reference.3. [阅读全文]

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Sequencing off Bacterial Genomic DNA with ABI Big Dye Terminators
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:12
标签: DNA Sequencing

摘要:The following protocol and cycle conditions courtesy of Cheryl Heiner-ABI--------------------------------------------------------------------------------Protocol:Big Dye Terminator Mix* 16μlThermoF[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:11
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摘要: There are several ways to prepare DNA from plants. I have found this method to be extremely efficient and quick. The DNA prepared via this protocol can be used in any PCR reaction. However, the DNA f[阅读全文]

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Southern?Analysis
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:11
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摘要:Southern Analysis Procedure (for analysis of genomic DNA or ordering of clones): 1) Prepare genomic DNA (ref.p.9.22, Maniatis) from cultured cells using one T75 flask (wash two times with PBS and then[阅读全文]

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Silica Clean-up of DNA
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:11
标签: Silica Clean-up

摘要:Silica Suspension: add 2 g of silica to 15 ml of H2Owash 3x by centifugation at 2000 x g for 2 minestimate vol of silica and resuspend in 2 vol H2O Silica Wash Solution: 50 mM NaCl,10 mM Tris 7.5,2.5 [阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:11
标签: 桑格 DNA测序方法

摘要:sanger是英国生物化学家,1918年8月13日生于英格兰格洛斯特夏郡,在剑桥大学圣· 约翰学院获哲学博士学位,毕业后到著名的剑桥医学研究会分子生物学实验室工作。Sanger的工作主要研究蛋白质的结构,特别是研究测定[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: SDS碱裂解法 质粒 小量制备

摘要:用碱和SDS处理可以从中度规模(20~50ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的DNA产物可用于电泳分析或限制性内切核酸酶消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。 [阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: SDS碱裂解法 质粒 中量制备

摘要:碱和SDS处理可以从中度规模(20~50ml)的细菌培养物中分离质粒DNA,所获得的DNA产物可用于电泳分析或限制性内切核酸消化,经柱层析进一步纯化之后,还可用于转染哺乳动物细胞。[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: SDS裂解法 质粒 DNA

摘要:这种温和的方法在处理大质粒(>15kb)时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒DNA混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。 [阅读全文]

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Southern-blotting
词条创建者:admin创建时间:12-09 23:08
标签: Southern-blotting 杂交

摘要:核酸分子杂交技术用一段核酸片段带上特殊标记物后,在一定温度,离子强度,PH条件下,与相同or相似的核酸分子以硷基互补原则(C≡G, A=T,A=U)形成新的杂合分子的过程,以检测核酸分子的存在。根据反应性质分为:RNA-RNA, RNA-[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:07
标签: smart cDNA文库

摘要:smart cDNA文库的构建方法 版权所有,请勿转载。[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:06
标签: SNP 单核苷酸多态性

摘要:介绍SNP(单核苷酸多态性)的动画和意义SNP(单核苷酸多态性)[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:06
标签: SDS碱裂解法 小量提取 小麦 基因组DNA

摘要:1、取0.1~0.2 g左右小麦叶片于1.5 ml的Eppendorf离心管中,将离心管直接放入盛液氮的冰壶中冷冻。从冰壶中取出离心管,用小玻璃研棒直接插入离心管中迅速研磨,至淡黄色粉末为宜;2、向离心管中加入600 ml的DNA提取缓冲液S,[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:06
标签: Southern 转印分析

摘要:在胶体中的DNA 可利用毛细现象的作用将DNA 牵引转印至覆盖在胶片上的滤膜,经烘烤或UV 照射后,可使DNA 固定在膜上,以进行探针的杂合(hybridization) 反应。仪器用具:玻璃缸;玻璃板或吸水海绵;Crosslinker (Stratalinke[阅读全文]

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词条创建者:admin创建时间:12-09 23:06
标签: 吸附法 分离 纯化 DNA

摘要:药品试剂:经BamHI 及HindIII 作用的pBlueGus 及pQE31含EtBr 的1.2% 12-well agarose gel1×TAE 电泳缓冲液QIAquick Gel Extraction Kit (Qiagen),内含:QIAquick spin column (管柱底部为silica gel membrane)Bu[阅读全文]

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