摘要:1.Laboratory DesignPerhaps one of the most under-rated aspects of tissue culture is the need to design the facility to ensure that good quality material is produced in a safe and efficient manner. Mos[阅读全文]

摘要:最近忙于用邮箱回答网友们关于DC培养的问题。其中比较突出的问题是DC数量少或养不出来DC，细细比较他们的培养方法，发现许多网友采用“用不含GM-CSF的1640贴壁3小时”的方法，也有采用筛网过滤细胞的，下面我仅[阅读全文]

摘要:例一 gongyulai ：我用的是药物诱导癌细胞凋亡，做DNA Ladder（用的是北京鼎国的动物细胞凋亡梯子提取试剂盒）。跑出来的电泳不是一条条带，而是每条很长的拖尾现象，Marker到是出来了。我是按说明书上0。8%的琼脂糖。我用的是[阅读全文]

摘要:DMEM培养基的制备，详情请见视频。DMEM培养基的制备本视频来源于网络，如有异议请联系我们，我们将在3个工作日内作出处理。[阅读全文]

摘要:细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩， 染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂， 形成50~300kbp长的DNA大片段， 或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段， 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱（DNA ladder）。细胞经处理后，[阅读全文]

摘要:一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个 50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1[阅读全文]

摘要:总结了分子克隆中DNA凝胶电泳常用试剂的配制，与大家共享：DNA凝胶电泳常用试剂配制.doc[阅读全文]

摘要:Contributor: Suprya JayadevDate: November 10, 19931) Prepare a C-18 reverse phase prep-sep cartridge by washing with:a) 10 ml of methanolb) 20 ml of chloroform-methanol (2:1)c) 10 ml of methanold) 10 [阅读全文]

摘要:一、测序的基本原理：测序的基本原理是Sanger末端终止法，在酶的作用下将原本是一条长达数百碱基的片断扩增成数百条片断，彼此间相差一个碱基。用电泳分离这些片断后，再通过测序仪将这些信号转变成峰图，从而最终形成客户[阅读全文]

摘要:DNA测序原理和方法DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和310[阅读全文]

摘要:（1）10 ×缺口平移缓冲液：200mmol/l Tris-HCl，pH7.4含50mmol/L MgCl2；100mmol/Lβ-巯基乙醇、1mg/ml BSA。　　（2）缺口平移反应终止液：200mmol/L NaCl；10mmol/l Tris-HCl，pH7.4；11mmol/L EDTA； 0.5% SDS。　　（3）DNa[阅读全文]

摘要:The success of DNA purification can have profound consequences on the success or failure of any injection effort. This summary of techniques from several different sources was compiled by Brad Preston[阅读全文]

摘要:1. Remove 0.5 cm of tail into polypropylene microfuge tube (do not mince). (The tubes must have tight-fitting caps, so that there are no leaks in steps 3 and 7 below.) 2. Add 0.5 ml DNA digestion buff[阅读全文]

摘要:提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下[阅读全文]

摘要:Reagents Agarose, UltrapureAmpli Taq polymerase 5 U/µlBuffer, 10X and 25 mM MgCl 2Loading buffer, 5XEthidium BromidePrimer “UN1”10X TAE bufferTemplate DNAUse 400 – 600 ng for e[阅读全文]

摘要:当我们已经获得目的基因片段，选择好适当的克隆（或表达，转化）质粒载体， 并确定重组方案后，下面要进行的就是ＤＮＡ片段之间的体外连接，从而获得重组子。 此重组子可转入相应的宿主菌中用于对目的基因的扩增以及目的基因表[阅读全文]

摘要:采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同（主要是盐离子浓度不同）或反应温度不同，[阅读全文]

摘要:1、 连接缓冲液的影响：大体上缓冲液含有以下组分：20-100mmol/L的Tris-HCl，较多用50mmol/L，pH的范围在7.4-7.8，较多用7.8，目的是提供合适酸碱度的连接体系；10mmol/L的MgCl2，作用是激活酶反应；1-20mmol/L的DTT，较多用10m[阅读全文]

摘要:DNA损伤遗传物质的结构改变而引起的遗传信息改变，均可称为突变。从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。在复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤(DNA damage)。突变的意义（1）突变是[阅读全文]

摘要:复制复制是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。复制的化学反应 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 半保留复制概念：DNA生物合成时，母链DNA解开为两[阅读全文]