摘要:Caltech Genome Research Laboratory,California Institute of Technology Introduction Preparation of BAC vector DNA Preparation of source DNA Ligation and Electroporation Preparation of BAC DNA [阅读全文:]
摘要:利用计算机来协助克隆 基因,称为“电子”基因克隆 (sillcon cloning),是与定位克隆 、定位候选克隆 策略并列的方法之一,即采用生物信息学的方法延伸EST序列,以获得基因部分乃至全长的cDNA序列。EST数据库的[阅读全文:]
摘要:DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),[阅读全文:]
摘要:实验题目 :目的基因的亚克隆 一、实验目的 1、掌握细菌基因组提取的方法和原理。2、掌握限制性核酸内切酶处理基因组及其结果分析。3、掌握基因片段回收的方法。二、实验原理 细菌基因组的提取:通过碱法或者酶法裂解细菌之后,[阅读全文:]
摘要: Protocol written by Minoru Toyota 1. Materials 1.1. MCA Restriction enzymes SmaI, XmaI T4 DNA ligase Taq DNA polymerase 10X PCR reaction buffer: 670mM Tris-HCl, pH 8.8 40mM MgCl2 160 mM NH4 (SO4)2 10[阅读全文:]
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摘要: 分子生物学实验指南第3版,冷泉港出版社出版,被誉为“分子生物学实验的圣经”。 英文原版,PDF文档。Molecular Cloning 3.pdf [阅读全文:]
摘要:转染的定义是“将具生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能”。其中,核酸包括DNA (质粒和线性双链DNA ),反义寡核苷酸及RNAi(RNA interference)。基因转染技术已广泛应用于基因组功[阅读全文:]
摘要:1取5ml噬菌体溶液放入无菌干净的小烧杯中,缓缓加入固体NaCl,使其终浓度为1M(0.292g),充分溶解后冰浴1小时。24℃下11000rpm离心10min,取上清液于另一个干净烧杯中,将PEG6000加入烧杯中使其终浓度为10%W/V,约0.5克),磁力[阅读全文:]
摘要:Purpose: Purification of oligonucleotides (which have already been purified by reverse phase) can increase the efficiency of site directed mutagenesis from around 30% to ~75% or greater in some cases [阅读全文:]