摘要:一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低[阅读全文]

摘要:一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应(一)原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状。(二)细胞松驰素B处理成纤维[阅读全文]

摘要:一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测[阅读全文]

摘要:一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测[阅读全文]

摘要:以有丝分裂方式增殖的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程。这一过程周而复始。细胞周期是50年代细胞学上重大发现之一。在这之前认为有丝分裂期是细胞增殖周期中的主要阶段，而把处于分裂间期的细胞视为细胞[阅读全文]

摘要:一、普通光学显微镜观察方法 （一）苏木素－伊红染色（HE 染色法） 石蜡组织切片的HE染色1、取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，4μm切片。2、切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min&rarr[阅读全文]

摘要:1、高速组织捣碎： 将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。2、玻璃匀浆器匀浆： 先将剪碎的组织置于管中，再套入[阅读全文]

摘要:1、体外细胞培养结束后，去培养液，加入11％的戊二醛固定，置于振荡器上摇20min。2、固定细胞用去离子水洗涤至戊二醛液洗净。3、置空气或烘箱37℃彻底干燥。4、加入0.1％的结晶紫液对细胞染色，振摇30min。5、用蒸馏水洗涤，至多余的[阅读全文]

摘要:1、96孔细胞培养板中培养细胞，去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次（如为悬浮细胞则用离心洗涤）。2、去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3、37℃，孵育1～4h。4、加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5、在多孔酶标仪上405nm处测光吸[阅读全文]

摘要:1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中（内放置一盖玻片），培养1天，用含0.4％FCS培养液同步化3天，使绝大多数细胞处于G0 期。2、终止细胞培养前，加入BrdU（终浓度为30μg/L），37℃，孵育40min。3、弃培养液，[阅读全文]

摘要: 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1、光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现[阅读全文]

摘要:用途 在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的；相反，不产生荧光的细胞，表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性，用染料处理时，活原生质体不吸收染料，细胞未染上颜色，而死细胞立即吸附大量[阅读全文]

摘要:操作步骤（一） 鲜重1、在琼脂固体培养基上生长的细胞材料，可以采用取出细胞材料，洗去琼脂培养基，用滤纸吸干水分，再直接称取重量的方法。2、液体悬浮培养材料，可放在已知重量的尼龙丝网上过滤。并用水洗除培养基，进行抽滤[阅读全文]

摘要:基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括[阅读全文]

摘要:1、ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－2[阅读全文]

摘要:一、纺锤体阻断剂（Spindle inhibitor）在有丝分裂过程中，随着纺锤丝的形成，染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡，因此，改变细胞质的粘度，即可破坏纺锤体形成，从而使[阅读全文]

摘要:1、取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×104 ～10×104 靶细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5％CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步）2、[阅读全文]

摘要:用XTT代替MTT可省去溶解还原产物结晶的步骤，XTT可以被活细胞中的代谢酶还原成黄色水溶性的代谢产物（formazan）。代谢产物在OD450 处有吸收峰。[阅读全文]

摘要:1、培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测IL-3）到对数生长期。2、取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml含1×104 ～2×104 上述细胞之一的DMEM培养液（加10[阅读全文]

摘要:1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。2、吸去培养液，用PBS洗涤两次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前先离心）。3、每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养4小时。4、每孔加90&mu[阅读全文]